tym-a酶酶法生产蚕丝营养素和丝多肽的研究 - 生物多样性.pdfVIP

2006No.8 · · China Brewing 16 SerialNo.161 TYM-A酶酶法生产蚕丝营养素和丝多肽的研究 1 2 2 施安辉 ,靖 林 ,张文千 （1.山东大学微生物技术国家重点实验室，山东济南 250100；2.泰安市泰银制丝有限公司，山东泰安 271037） 摘 要：该文研究了适于蚕丝营养素和丝多肽酶解的诱变株米曲霉CV-8-1和芽孢-1-1的选育，2诱变株的最佳酶解条件的优化， 试验确定TYM-A复合蛋白酶的最佳配比及最佳酶解小试工艺条件。 关 键 词：蚕丝营养素；丝多肽；酶解工艺 中图分类号：Q814 文献标识码：A 文章编号：0254-5071（2006）08-0016-05 1 2 2 SHIAn-hui，JINGLin，ZHANGWen-qian， primarytestsweredetermined. Keywords:silknutrient;silkpeptide;enzymatictechnology 我国是世界上蚕丝生产与加工的大国，但制丝工业 丝素肽，变废为宝，形成循环经济链为利用绿色环保方 的主要副产物———下脚蚕茧、废丝和富含丝胶的废水却 法生产丝多肽开辟了新途径。 没有被很好地利用，即便利用经济价值也偏低。所以，目 1材料与方法 前国内的蚕丝生产与加工企业都非常关注“变废为宝”， 1.1主要材料与仪器 提高其经济效益的探讨与研究，特别是利用微生物工程 蚕茧、废蚕丝和丝胶回收液：由山东泰安市泰银制 技术选育高效降解丝蛋白的菌株，更是热点和难点。 丝有限公司提供；米曲霉CV-8-2和芽孢杆菌-1-1号，为课 蚕丝几乎全是由蛋白质构成，其蛋白质的含量高 题组分离选育；TYM-A复合酶：为课题组粗提。 达98%，蚕丝由丝胶和丝素2部分构成，丝素又称丝心占 超滤器和超滤膜为Millipore公司制造，日立835型 72%，其外层紧包着丝胶占26%。丝心蛋白质结构致密 氨基酸自动分析仪，日立635A型高效液相色谱仪。 为β-折叠结构，结晶度高，不溶于水，一般的酶不易催 1.2菌种的诱变[2,4] 化分解；而丝胶蛋白分子中极性基团稍多，无定形部分 1.2.1诱变程序 比例较高，因而亲水性较强，能与水形成均匀的胶溶 米曲霉诱变程序： 液，也易被酶催化，因此，在缫丝生产过程中，丝胶蛋白 米曲霉→紫外线诱变→初筛→复筛→ 大部分随水流失，造成极大的浪费和水质污染。 蛋白酶活力测定→斜面传代 通过近2年的研究，已分离选育到降解丝胶蛋白的 芽孢杆菌诱变程序： 米曲霉CV-8-1和降解丝素蛋白的芽孢杆菌-1-1号，经分 离培养，获得的发酵液经粗提获取酶制剂后，再按比例 公司堆集废丝的土壤→分离→酶活测定→紫外线诱变→ [1,3] 初筛→复筛→酶活测定→斜面传代 。 配制成复合酶TYM-A 把下脚蚕茧、废丝和缫丝生产过程中的丝胶液经预 1.2.2初筛酪素培养基（固体） 处理后，加入TYM-A酶，就可以获得高质量的丝胶肽和 磷酸二氢钾0.36g，磷酸氢二钠1.1g，硫酸镁0.5g，干 收稿日期：2006-03-23；修回日期：2006-05-22 作者简介：施安辉（1940-），男，山东莱州人，教授，研究方向为工业微生物及酶工程。 中 国 酿 造 2006年第