阿托伐他汀对自发性高血压大鼠AT-%2c1-受体影响.pdfVIP

中文摘要 前 言 他汀类药物是近十几年广泛应用于临床治疗高胆固醇血症的 药物。它可完全抑制胆固醇合成的限速酶3一羟基一3一甲基戊 二酸单酰辅酶A(HMG—CoA)还原酶，阻止乙酰辅酶A合成甲羟 戊酸，减少胆固醇合成。但是，近年大量研究表明他汀类药物具有 非调脂的多向性作用，这些非调脂作用可解释冠脉事件减少和这 些研究中的早期临床益处。AngⅡ在动脉硬化和高血压的发病机 制中有重要作用，其大多数心血管作用由血管紧张素Ⅱ1型受体 (A Tl—R)介导。在血管壁上调AT，一R可引起动脉粥样硬化。 当前的研究是应用阿托伐他汀治疗自发性高血压大鼠(SHR)，一 种在有高血压而无血脂紊乱的基础上有血管功能障碍的动物模 型，以确定他汀类药物是否可影响血管壁AT，一R基因的表达，探 讨他汀类药物非胆固醇依赖性作用的机制． · f ／实验材料 自发性高血压大鼠，阿托伐他汀，TRIzolRNA抽提试剂，各种 半定量逆转录多聚酶链式反应试剂，DNAmarker，兔抗鼠多克隆 AT。受体抗体，辣根过氧化物酶标记羊抗兔二抗。AT，一R和磷酸 甘油醛脱氢酶(GAPDH)引物序列。 实验方法 自发性高血压大鼠20只，阿托伐他汀组10只，予阿托伐他汀 ·l· 50mg·Kg～·d一治疗；对照组10只，予等量蒸馏水治疗，共治疗 4周。股动脉插管方法于清醒状态下测血压，BL一140生物机能 blot法检测动脉 实验系统记录并分析。用lit—PCR和Western AT，一R基因及蛋白表达：(1)治疗4周后无菌条件下取大鼠腹主 动脉，于液氮中保存；(2)RT—PCR检测法：①细胞总RNA提取： 提取；②逆转录反应：将提取的RNA逆转录成cDNA；③PCR扩 增：以cDNA为模板，扩增AT，一R的基因片段，以GAPDH为反应 内对照；@PCR产物的检测和半定量：取PCR产物进行琼脂糖凝 胶电泳，置于自动电泳凝胶成像分析仪中扫描并分析，以GAPDH 光密度值进行标准校正，对ATl—R基因进行半定量；(3)Western blot分析：取腹主动脉2—3cm，提取膜蛋白，聚丙稀酰胺凝胶分离 蛋白，转膜，封闭，一抗和二抗杂交，光密度仪分析，以背景光密度 值校正，计算ATl蛋白表达的相对量。 实验结果 阿托伐他汀治疗4周后，两组大鼠的体重相近。阿托伐他汀 0．01)，AT，受体蛋白的表达为29．9±7．3低于对照组87．9± 14．1(P0．01)，表明阿托伐他汀可显著降低动脉壁AT。受体基 因和蛋白的表达。 讨 论 II是该 肾素一血管紧张素系统是重要的体液调节系统，Ang ·2· 系统的重要生物活性肽，AngⅡ的各种生理作用均由血管紧张素 Ⅱ1型受体介导，AT。受体是有7个跨膜区的G蛋白耦联受体， AngⅡ与ATl受体结合可产生一系列变化。 许多因素可引起AT1受体上调而提高其与配体结合的效率。 Stanley等发现压力本身可上调ATI—R的表达。还有一些因素， 如胰岛素、低密度脂蛋白、高盐、高胆固醇血症等均可使ATl受体 上调。这些变化增加血管的收缩性，对血管活性物质反应性增高， 氧自由基释放增加，直接使VSMC肥大及增殖，血管壁增厚甚或狭 窄。 我们的研究显示用阿托伐他汀治疗血脂正常的SHR，可降低 血压。我们认为他汀类药物治疗SHR实验模型所观察到的临床 Was． 益处与体内他汀类药物诱导的AT．一R表达下调有关。Sven smann等研究显示，阿托伐他汀以