瘦素、胰岛素及IGF-2对滋养细胞中PKB和P-%2770-S6K蛋白表达影响及信号传导途径.pdfVIP

·中文论著摘要· 蛋白表达的影响及信号传导途径 目 的 出生体重与成年疾病密切相关，大量研究表明影响出生体重的因素主要包括： 营养因素、胎盘的结构和功能、生长因子以及激素。其中影响出生体重的多种生 长因子和激素中最有代表性的是瘦素、胰岛素及胰岛素样生长因子．2(IGF．2)。但 它们影响出生体重的信号通路仍不十分明确。越来越多的研究发现 节滋养细胞的生长和分化。本研究通过瘦素、胰岛素及IGF．2对滋养细胞中PKB 信号途径存在联系。 材料与方法 正常妊娠妇女进行人工流产手术时获取的绒毛组织，用0．25％胰酶4℃消化约 DNase 40min。离心后加入25IU／mlI作用10～15min。100目滤网过滤，用2．5％和 1．25％的BSA密度梯度沉降45min，收集下层滋养细胞离心后接种于预先涂有I型 胶原的培养皿中。37C含5％C02湿度为99％的孵箱中培养。根据细胞生长情况2～ 3d换液一次。取生长状态较好的滋养细胞血清饥饿24dx时后换成含10％胎牛血清 25nmol／L作 的DMEM培养液，分别给与瘦素10nmo／L；胰岛素6nmol／L；IGF．2 用24d,时。另一组同时分别加入LY294002 lOOnmol／L作用 20umol／L；rapamycin x 24d,时后收集细胞(5．6106)备用。将收集的细胞按凯基全蛋白提取试剂盒步骤加 提取液。考马斯亮蓝法蛋白定量，应用Westernblot技术检测瘦素、胰岛素及IGF．2 toolsfrom 白表达的影响。结果用gene syngene凝胶图象分析系统分析。资料以均 为差异有统计学意义。 结 果 照组相比明显增加(均PO．05)。 p70S6K蛋白的表达均明显降低(均P0．05)。 结论耋口 F匕 rapamycin所抑制。 信号通路实现的。 关键词 瘦素；胰岛素；IGF．2；滋养细胞；PKB；p70S6K 2 ·英文论著摘要· andIGF一2the Theeffectsof on leptin，insulin ofPKBandp70$6K inthe expression protein cellsandthe trophoblastic signalingpathway ob ．i to thebirth is relatedadult on diseases，Present weightclosely investigations thebirth indicatedthatthebirth