绞肌蓝热处理产物抗NSCLCA549细胞有效成分探究.pdfVIP

摘要 绞股蓝经高温、高压热处理得到的绞股蓝热处理产物与原药材 cell 相比，具有很强的抑制非小细胞肺癌(Non—smallcarcinoma， lung NSCLC)A549细胞的增殖活性。本研究目的：以绞股蓝热处理产物 为研究对象，分离、鉴定其有效成分，并评价它们对A549细胞增殖 的抑制作用。研究方法：分别通过100、110、120和1300(2及加热1 h、2 h和3h，确立制备绞股蓝热处理产物的最佳条件；利用大孔树 脂HP20吸附法，通过20％、50％及95％乙醇洗脱溶剂洗脱，筛选 有效部位；采用硅胶柱色谱、凝胶色谱及反相C，8色谱法，分离有效 成分；通过NMR、Mass、UV等分析手段，鉴定有效成分的分子结 构；运用MTr法检测绞股蓝热处理前后总提物及有效成分对A549 细胞增殖的作用；利用UPLC．MS分析方法，测定不同热处理条件 下的绞股蓝热处理产物及原药材中有效成分的含量。研究结果： (1)绞股蓝热处理产物的最佳制备条件为1300C、O．24MPa热处理3 h，其乙醇提取物与原药材乙醇提取物相比，具有更强的抑制A549 细胞增殖作用，其ICso-+SD值为198．13_+7．60 I_tg／mL，而原药材乙醇 提取物为411．61_+32．43 I-tg／mL。(2)绞股蓝热处理产物在大孔树脂 HP20的不同极性洗脱部位中，95％乙醇洗脱部位对A549细胞增殖 具有较强的抑制作用。(3)从95％乙醇洗脱部位中分离、鉴定出4 种达玛烷类皂苷，分别为达木林A(damulinA)、达木林B(damulin B)、绞股蓝皂苷LI(gypenoside L．)， LI)及绞股蓝皂苷L(gypenoside 其中达木林A与达木林B是绞股蓝热处理后新发现的化合物。(4)这 i 四种化合物均具有较强的抑制A549细胞增殖作用，其IC50_SD值分 别为26．984-0．5 性对照物人参皂苷R93(S)为39．264．2．05gg／mL。(5)四种达玛烷类皂 苷在绞股蓝中的含量检测结果，在相同加热时间条件下，随着热处 理温度的升高而增加；在同等温度条件下，随加热时间的增加而提 高，最佳条件为130。C温度、O．24MPa压力、热处理3h，此时的绞 股蓝热处理产物中含达木林A、达木林B、绞股蓝皂苷LI(gypenoside L)分别为11902．19_+0．18， LI)及绞股蓝皂苷L(gypenoside 可以成为一种从天然物中获得更多活性成分的有效途径。 关键词热处理绞股蓝，达玛烷类皂苷，非小细胞肺癌A549细胞增 殖，含量测定 ABSTRACT Heat-processedGynostemmapentaph)7llumbyhightemperature and showedmore non—smallcell highpressure inhibitoryactivityagainst cellsthanthatofthecrude carcinoma(NSCLC)A549 lung plant．The of weretoisolateand theactive objectivesstudy identify constituents andevaluatetheirA549cell activitiesfromthe