血管瘤分子机制的初步分析及其临床应用.pdfVIP

圭塑蔓三墨型奎堂垫!!塑堕主竺望些笙兰——』巳!!!兰 中文摘要 研究背景 血管瘤是婴幼儿期最常见的良性肿瘤，但其发生机制尚未阐明， 通过基因芯片技术寻找同一血管瘤患者、同一病灶的增生期和消退 期组织中差异表达的基因，从而对血管瘤发生(血管发生)的分子 机制有一整体的认识。从中提示血管瘤从增生到消退的分子途径、机 制。通过我们的研究进一步证实血管形成参与血管瘤的发生、发展， 血管瘤的发生是血管形成的促进因子和抑制因子的平衡失调所致， 而血管形成因子中VEGF和bFGF的作用是比较肯定的，我们试图通 过ELISA技术检测血管瘤不同时期和血管畸形患儿的血清VEGF和尿 bFGF浓度，从而找出它们的标准曲线以及数值范围，希望它们成为 血管瘤常规的检查手段，从而有助于血管瘤、血管畸形的诊断和治 疗。 目的 本研究旨在： 1．通过基因芯片技术寻找同一血管瘤患者、同一病灶的增生期 和消退期组织中差异表达的基因，从而对血管瘤发生(血管发生) 的分子机制有一整体的认识，从中找出血管瘤从增生转化为消退的 分子途径、机制。 2．通过ELISA技术检测血管瘤不同时期和血管畸形患儿血清 VEGF和尿bFGF浓度，从而找出它们的标准曲线以及数值范围，希望 它们成为血管瘤常规的检查手段。 方法 2 圭塑苎三墨型盔堂!!!!丝堡主生里些笙奎 一—————————J苎!!哩 1．将4096条cDNA用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯 片；将同一血管瘤患儿的增生期和消退期瘤体组织的mRNA逆转录 表达谱芯片进行杂交，通过计算机扫描、数据处理筛选出差异表达 的基因。通过查阅文献对它们进行综合分析，从中找出血管瘤从增 生转化为消退的分子途径、机制。 2．对59例增生期血管瘤、38例消退期血管瘤、18例血管畸形、 linkedimmunosorbent ELISA)检查，测定他们的血清VEGF assay， 浓度。 3．对69例增生期血管瘤、4l例消退期血管瘤、23例血管畸形、 查，测定他们的尿bFGF浓度。 结果 1．基因芯片结果：差异表达的基因有194条，其中115条基因 上调，79条下调，增生期与消退期基因表达谱的改变初步反映了血 管瘤增生与自然消退的分子机制：(1)增生期一些细胞因子和生长 因子高表达；(2)消退期细胞凋亡因子表达增加，并有免疫防御反 应发生，以清除体内的增生性细胞；(3)血管形成和原癌基因参与 血管瘤的增生，其中还发生细胞-细胞外基质的粘附；(4)线粒体激 展有关。 发现血管瘤增生期的VEGF浓度显著高于消退期血管瘤、血管畸形 和阴性对照，而消退期血管瘤、血管畸形和阴性对照之间的差别没 有显著性；另外，6例血管瘤患儿(自身对照)激素治疗后的血清 VEGF浓度显著性降低。 占塑篁三匡型查兰!!螋丝堕圭生望些丝塞———————_!羔!!堕 差分析，发现血管瘤增生期、消退期、血管畸形和阴性对照之间的 尿bFGF浓度的差别没有统计学意义。 结论 I．初步的研究发现一些生长因子在血管瘤的增生期表达异常增 多，而到了消退期促进细胞凋亡的信号转导通路增强，这是贯穿血 管瘤增生和消退的一个主线，由此可以推断血管瘤的发生可能是细 胞增殖和凋亡比例失调所致，利用该技术迸一步深入的研究有望阐 明血管瘤和血管形成的分子机制； 2．用ELISA方法检测血清VEGF浓度是一无创、简单而有效 的鉴别血管瘤和血管畸形、判断血管瘤是处于增生还是消退期、判 断血管瘤治疗的有效性以及动态监测血管瘤病程的方法，可推荐成 为血管瘤诊断和治疗的一种常规的临床检测手段： 3．用ELISA方法检测尿bFGF浓度难以有效地鉴别血管瘤和血 管畸形、判断血管瘤是处于增生期抑或消退期以及动态监测血管瘤 的病程等，与目前广为引用的Fishmanl996年大会宣读的结论不一 致，我们的结果可能会为血管瘤的发生机制提供一些线索。 关键词