血红蛋白和菌紫质的超快光动力学分析.pdfVIP

论文摘要 对于高等脊椎动物来说红细胞中的血红蛋白是非常重要的。在富氧环境中 氧与血红蛋白结合形成氧合血红蛋白，其结构为松弛态(R念)；而氧合血红蛋 白在低氧环境中释放氧则形成去氧血红蛋白，结构为紧张态(T态)。因为血红 蛋白在生理学上的重要性，氧合血红蛋白在分离和再结合时的动力学过程被广泛 研究，其过程可被分为以下几个步骤：血红蛋白和氧的成对复合的快过程和慢过 程，其慢过程伴随着蛋白结构的变化及血红蛋白和游离态氧的复合过程(rls ms)；对于血红蛋白和氧成对复合的快过程，其中拟合时间常数为2．5ps左右 的为氧和Hb+。(激发态血红蛋白)的再绑定过程，而成对复合的快过程需要100 200ps。在我们的实验中，使用了400nm的单色飞秒泵浦探测技术。在对实验 中得到的结果进行数值拟台后，其动力学过程弛豫时间常数分别为约300rs 基态的弛豫过程，及血红蛋白与氧成对复合的快过程。 另外，我们还研究了在活体红细胞内的血红蛋白的超快光动力学过程。其 处于红细胞中的血红蛋白和在水溶液中的血红蛋白在这个过程中的三个时削常 数是一致的。这说明虽然有报道氧合过程中细胞膜起了重要作用，但在我们的实 验中探测时间小于lns时解离的氧仍然在血红蛋白的分予包裹中，因此细胞膜虽 然在lOOns级别的慢过程中起重要作用，但在小于ins的快过程中对血红蛋白和 氧的成对复合过程没有作用。 很多实验证明过量钙离子可以使血红蛋白束缚在细胞膜上，而严重影响红 细胞的变形能力，并且可能与镰刀病，遗传性球形细胞增多症及地中海贫血等血 液疾病有关。因此血红蛋白对红细胞的变形能力也有重要影响。虽然目前这方而 的工作已经进行了很多，但很少有工作涉及血红蛋白束缚在细胞膜上以后的光动 力学性质，并且其与『F常血红蛋白的区别目前也并不清楚。 在我们的工作中，同样使用了400nm的单色飞秒泵浦探测技术来进行研究。 为了与束缚在细胞膜上血红蛋白的光动力学性质作比较，我们先测了水溶液中血 红蛋白在高钙离子环境中的动力学过程。对含0．2M钙离子的血红蛋白水溶液的 实验得到的结果是其动力学过程与一般血红蛋白水溶液极为接近，拟合后的数据 蛋白没有明显的直接影响，但可以使血红蛋白束缚到细胞膜上从而影响红细胞的 变形能力，这与之前的许多工作结论是一致的。 关键词：血红蛋白；红细胞；细胞膜；钙；动力学；飞秒；泵浦探测技术 中图分类号：Q631 Abstract is ferallvertebrate Hemoglobin(Hb)inimportant erythrocyte anenvironmentof concentrationthe iS organisms．In highoxygen oxygen boundtoHbin form Hb)withthe 1igandbecomingoxyhemoglobin(oxy structureknownasR releasedfrom Hbi nanenvironment state，and oxy oflow concentration lib)withthe oxygen becomingdeoxyhemoglobin(deoxy structureofTstate．Becausethe of in importanceHemoglobinphysjo]ogy the of Hbdisassociationandreeombinationhavebeen dynamicsoxy canbeconcluded