氡对hbe细胞氧化损伤的研究 oxidative damage of human bronchial epithelial cells induced by radon exposure.pdfVIP

第31卷第2期 辐射研究与辐射工艺学报 V01．31．No．2 2013年4月 J．Radiat．Res．Radiat．Process． 2013 April 氡对HBE细胞氧化损伤的研究 刘星1 聂继华1 陈志海1金洹宇1陈秋2 周新文2焦吻2童建1安艳1 1(苏州大学公共卫生学院苏州215123) 2(苏州大学放射医学与防护学院苏州215123) 摘要探讨不同浓度氡对永生化人支气管上皮细胞(HBE)氧化损伤的影响。体外培养HBE细胞，在氡浓度 检测细胞DNA链断裂情况。结果表明：随染毒时间延长，MDA和ROS含量明显上升(口0．05)，SOD活力 剂量反应关系。氡可诱导HBE细胞产生大量自由基造成DNA损伤，从而对HBE细胞产生毒效应。 关键词氡，HBE细胞，氧化应激，DNA损伤 中图分类号R114，R818 氡普遍存在于自然环境中。人类天然辐射剂量 试剂盒(Cell Counting 中氡及其子体所占比例约为50％以上LlJ。氡及其子 司)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物技术 体暴露不断积累，其衰变产生的0【粒子在体内引起 研究所)；活性氧检测试剂盒(碧云天生物技术研究 基因组不稳定，从而增加肺癌发生的可能性。本研 所)：超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(南京建 究采用不同浓度氡染毒，以永生化人支气管上皮细 成生物工程研究所)；微量丙二醛(MDA)检测试 胞(Humanbronchial cells，HBE)为研究剂盒(南京建成生物工程研究所)。 epithelial 对象，观察HBE细胞的超氧化物歧化酶(Superoxi 1．2 实验方法 dismutase，SOD)活力、活性氧(Reactive oxygen 1．2．1 细胞培养与染毒方法HBE细胞在5％ species，ROS)和丙二醛(Malondialdehvde，MDA) 的含量以及DNA损伤情况，为进一步探讨氡对 C02、37℃条件下，常规培养于DMEM培养基中(内 DNA损伤影响提供实验依据。 含10％FBS)。取处于对数生长期的细胞制各单细胞 1实验材料和方法 养皿内，每-孑LDH入DMEM培养基1．5mL。待细胞 贴壁24h后，将Transwell培养皿置于细胞气体染 1．1 实验材料 毒装置染毒，培养基雾化保持细胞湿润，氧气浓度 21％，流量10mL／min。 HBE细胞由中山大学陈雯教授惠赠；BD 1．2．2 细胞毒性实验 将HBE细胞以每孔以 FACSCalibur流式细胞仪(美国)；Olympus倒置显 微镜(日本)；Eppendorf低温离心机(德国)；Thermo 000 氡浓度为20 min、 C02恒温培养箱(美国)；DYY-III一7B型转移电泳 Bq／m3，染毒时间分别为15