奶水牛牛分枝杆菌的分离与鉴定.pdfVIP

· 32 · AnimalHusbandry＆ Veterinary Medicine 2008 Vo1．40 No．11 奶水牛牛分枝杆菌的分离与鉴定 谢志勤 ，谢芝勋 ，刘加波 ，庞耀珊 ， 邓显文 ，谢丽基 ，温 娟 (1．广西兽医研究所，广西 南宁 530001；2．广西南宁市兽医站，广西 南宁 530001) 摘要 ：从患疑似结核病的广西奶水牛群中进行牛分枝杆菌的分离和鉴定。共收集了238份临床样品 (鼻黏液及牛奶)，病料经1．25moL／mLNaOH 溶液预处理后，接种罗氏培养基进行细菌分离。分离菌经进一步纯化后进行抗酸性染色并镜检，镜检后判为阳性的细菌再接种到鉴别培养基上进 行鉴别培养，同时，应用PCR方法对镜检为阳性的细菌进行进一步的鉴别检验。结果收集的所有l临床样品，经37℃培养后共获得细菌 l2株。这 12株菌经抗酸性染色后镜检都为分枝杆菌阳性，进一步经鉴别培养基鉴定 12株菌中有 2株为牛分枝杆菌，其余均为非典型分枝杆菌。2株牛分 枝杆菌经PCR方法鉴定得以确诊。 关键词 ：奶水牛；牛分枝杆菌；分离；鉴定 中图分类号：$852．6 文献标识码：A 文章编号：0529—5130(2008)l1—0o32。o4 IsolationandidentificationofMycobacterium bovis from milkwaterbuffalo XIEZhi．qin ，XIEZhi．xun ，LIUJia—bo ，PANG Yao．shan， DENGXian．wen，XIELi-ji，WENJuan (1．GuangxiVeterinaryResearchInstitute，Nanning530001，China； 2．VeterinaryStationofNanning，Nanning530001，China) Abstract：ToisolateandidentifyMycobacteriumbovisfrommilkwaterbuffalosuspiciousoftuberculosisinGuangxi ， atotalof238clinical samples(Nasalswapsandmilk)werecollected．Thematerialwastreatedin1．25mol／mLNaOHsolutionandinoculatedontoLowenstein— Jensenslants(L—Jmedium)．ThebacteriumwasstainedwithZiehl—Neelsm methodafterisolationandobservedunderthemicrocopv．The positivebacterium wastransfefredtothespecialmedium fordistinction．Simultaneously，PCR methodwasusedtocarryonthefurtherdis． tinctionexamination．Theresultsshowedthat12bacterialstrainswereobtainedfrom thesesamplesandallofthem werepositiveundermicro． copyafteracid—faststaining．Furtheridentificationwasperformedbythespecialmedium andPCR．Twooutof12strainswerepositiveofrM