《分子生物学》课件-分子生物第十章 分子生物学与药物研究.pptVIP

第十章 分子生物学与药物研究 第一节 药物靶点 新药创制两个阶段： 药物发现和新药开发 药物发现四个环节：靶点确证、建立模型、发现先导化合物 、优化先导化合物 药物发现的首要任务和关键：靶点确证 一、概述 药物靶点 ：是指生物体内的一类大分子及其特定结构位点，具有重要的生理功能，其活性可以通过与药物分子的结合而改变，并产生预期的药理效应 药物靶点分类 靶点确证流程 分析确证疾病相关生物分子：基因组学、蛋白质组学、生物信息学和生物芯片技术等 确定候选药物靶点：功能研究 验证靶点的有效性：设计小分子化合物或蛋白质，在分子水平、细胞水平和整体水平上进行药理学实验 二、基因组学与靶点确证 主要是利用基因组学的大量研究信息，结合转录组学和蛋白质组学的研究信息，再通过计算机分析来实现 (生物信息学) 三、反义核酸技术与靶点确证 四、核酶技术与靶点确证 五、RNA干扰技术与靶点确证 六、蛋白质组学与靶点确证 七、生物信息学与靶点确证 八、基因芯片技术与靶点确证 九、噬菌体展示技术与靶点确证 十、化学基因组学与靶点确证 第二节 生物技术制药 生物技术制药：指以现代生物技术为主要手段研发药物 采用的分子生物学技术：基因工程技术、蛋白质工程技术、酶工程技术、核酸药物技术 制备的药物：蛋白质/多肽药物和核酸药物等 一、基因工程技术制药 基因工程技术是现代生物技术的核心 基因工程药物是指利用基因工程技术生产的细胞因子、激素、酶、疫苗、单克隆抗体等 优点：解决来源问题和安全问题 考虑：药物特性、来源实用性、产量、安全、管理控制、专利、公众观念等问题 二、蛋白质工程技术制药 蛋白质工程 ：制备非天然蛋白质的技术，即根据蛋白质的结构和活性的关系，通过蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究获取关于蛋白质的物理、化学等方面的信息，在此基础上对蛋白质的编码基因进行设计改造，并通过基因工程等手段进行表达和分离纯化，最终投入应用。 蛋白质工程内容和策略 内容： 根据需要，应用重组DNA表达具有特定氨基酸序列和空间结构的蛋白质 确定蛋白质的一级结构、空间结构与生理功能的关系 根据氨基酸序列预测蛋白质的空间结构和生理功能，设计并合成具有特定生理功能的工程蛋白 策略： 合理设计(小范围改造、较大程度的改造、从头设计) 定向进化 三、酶工程技术制药 酶工程技术 ： 是指在一定的生物反应器中利用酶的催化作用进行物质转化的生物技术，其应用范围已经遍及工业、农业、医药、食品、环境保护及能源开发等，成为潜力巨大的新兴产业。 四、新型生物技术制药 新型生物技术这里是指转基因技术、基因打靶技术、反义核酸技术、RNA干扰技术等 共同特点（属于基因工程技术）: ①产品称为核酸药物（基因治疗） ②起步较晚，绝大多数还处在开发阶段 核酸药物 ：化学本质是核酸及其人工合成类似物，主要包括基因药物、反义药物、核酶、小干扰RNA、核酸疫苗、核酸适体 (一)基因药物 基因药物：是携带治疗基因的载体，应用时将其导入患者体内，表达目的蛋白，从而达到防治疾病的目的 细胞因子和生长因子类基因药物是目前尝试最多的基因药物 (二)反义药物 反义药物 ：是一类寡核苷酸或其类似物，导入细胞之后可以在转录、转录后加工、翻译等环节阻遏特定基因的表达，用于治疗基因表达紊乱或病原体感染等相关疾病 根据化学本质、作用靶点和作用机制，反义药物可以分为反义RNA、反义DNA和肽核酸等 (三)核酶 核酶技术是利用核酶的高度特异性，阻遏靶细胞有害基因mRNA的翻译或促进其降解的技术 抗乙型肝炎病毒 (HBV)和抗艾滋病病毒 (HIV)的治疗 多采用锤头状核酶 (四)小干扰RNA与微RNA 小干扰RNA(siRNA)与微RNA(miRNA)是两类结构和功能都很相似的RNA片段: 是双链RNA片段，长度为20-25bp; 具有3’黏端，有两个末配对碱基 其一股RNA称为指导股，可以与真核细胞内含有其互补序列的mRNA结合指导股结合的结果是阻遏基因表达，使基因沉默 (五)核酸疫苗 核酸疫苗 ：第三代疫苗 (前两代分别为病原体疫苗和基因工程疫苗)，包括DNA疫苗和RNA疫苗，用于抗寄生虫、细菌、病毒、肿瘤 实验阶段，多集中在DNA疫苗的研究 DNA疫苗：将抗原基因与真核表达载体重组的产物 (六)核酸适体 （aptamer） 适体 : 是其靶分子的所有配体中亲和力最强的 化学本质：核酸 (严格意义上是寡核苷酸)或肽----核酸适体和肽适体 几乎没有免疫原性，在体内不会引起免疫排斥反应 易于修饰，从而改善在体内的稳定性和滞留时间 核酸适体药物的特点 特异性极高 免疫原性极小甚至没有免疫原性 制备简单、储存方便 第三节 中