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第八章 微生物的遗传、变异与育种2
第八章 微生物的遗传、变异与育种 2011。11。26 /content/begin/cells/ 目 录 第一节 遗传的物质基础 第二节 微生物的基因组结构 第三节 质粒和转座因子 第四节 基因突变与修复 第五节 细菌基因转移与重组 第六节 真核微生物的遗传特性 第七节 微生物育种 第一节 遗传的物质基础 一、DNA作为遗传物质 二、RNA作为遗传物质 三、朊病毒的发现与思考 遗传 生物的上一代将自己的性状稳定地传递给下一代的行为或功能,称为遗传。 遗传具有极其稳定的特性。 一、DNA作为遗传物质 1、Griffith的转化实验 2、DNA作为遗传物质的第一个实验证据 3、T2噬菌体的感染实验 DNA作为遗传物质 细菌的基因组位于核体,是遗传的主要物质基础。 核体又称染色体,是由双条环状双螺旋DNA长链组成的,含有的遗传基因,控制着细菌的遗传与变异。 1、Griffith的转化实验肺炎双球菌的转化实验 S型菌:有荚膜的光滑型smooth,有致死性。 R型菌:无荚膜的粗糙型rough,无致死性。 S型可以向R型突变。 R型可向S型回复突变。 Griffith的转化实验 肺炎双球菌荚膜转化 Griffith的转化实验的步骤 1、将具有致死性的SⅢ型肺炎双球菌直接注射小鼠;小鼠死亡。能分离到SⅢ型肺炎双球菌。 2、将由SⅡ型肺炎双球菌突变而来无致死性的R型注射小白鼠,小鼠不死,能分离到R型肺炎双球菌; 3、将具有致死性的SⅢ型肺炎双球菌杀死(灭活)后注射小白鼠,小鼠不死,也不能分离到肺炎双球菌; 4、将具有致死性的SⅢ型肺炎双球菌杀死(灭活)后和无致死性的R菌放在一起注射小白鼠。结果:小鼠死了,并从死亡小鼠中分离到具有致死性的SⅢ型肺炎双球菌。 SⅢ型从哪来?如果是R型回复突变,则应该是SⅡ型! 唯一的解释是活的无致死性的R型获得了SⅢ型的遗传物质,使其产生荚膜,成为致死性的SⅢ型。 Griffith将这种现象称为转化(transformation)。从离体实验得到证实。将引起转化的遗传物质称为转化因子。 转化 转化是指受体细胞直接摄取供体细胞的遗传物质(DNA片段),将其同源部分进行碱基配对,组合到自己的基因中,从而获得供体细胞的某些遗传性状,这种变异现象称为转化。 2、第一个证明DNA是遗传物质的实验 Avery,C.M.MacLeod and M.J.McCarty: 从SⅢ型活菌体内提取DNA、RNA、蛋白质和荚膜多糖,将它们分别和 RⅡ型活菌混合均匀后注入小鼠体内,结果只有注射SⅢ型菌DNA和RⅡ型活菌混合液的小鼠才死亡,这是因为一部分 RⅡ型菌转化后,产生有毒的、有荚膜的SⅢ型菌所致,并且它们的后代都是有毒、有荚膜的。 由此说明RNA、蛋白质和荚膜多糖均不引起转化,而DNA却能引起转化。如果用DNA酶处理DNA后,则转化作用丧失。 说明DNA是转化发生的必须转化因子。 因为DNA没有提纯,有人怀疑是蛋白质在起作用。 他们继续实验,将DNA提纯后再转化,转化效果更好,并随DNA浓度的增加而增加。 故证明: DNA是遗传物质的载体。 转化的实质 转化的实质是S型死菌的DNA或基因与R型活细菌DNA之间发生重组,使后者获得了新的遗传信息。 外源DNA分子一旦找到它的内源同源体,这两个分子就可进行遗传交换了。 交换的结果是外源DNA被整合,而同源的内源DNA分子从R型细菌的DNA中排斥出去,从而产生由R型细菌变为S型细菌的遗传转化。 影响R型菌转化的因素 1.供体细胞DNA浓度。浓度越高,转化率越高。 2.两种细菌的亲缘关系。亲缘关系越近,转化越容易。 3.受体菌状态。只有处于感受态细胞才能被转化。 3、T2噬菌体的感染实验 1952年,Alfred D. Hershey和Martha Chase 用32P标记T2噬菌体的DNA,用35S标记T2噬菌体的蛋白质外壳,然后将这两种不同标记的T2噬菌体与其宿主大肠杆菌混合培养。 结果发现:用35S标记蛋白质外壳的T2噬菌体感染大肠杆菌时,放射性活性物质留在宿主细胞外面,而用32P标记DNA的T2噬菌体, 32P标记的DNA进入宿主细胞内,并产生噬菌体后代.这些后代的蛋白质外壳组成、形状大小等特性均与留在细胞外的蛋白质外壳一模一样。 说明决定蛋白质外壳的遗传信息是在DNA上,DNA携带有T2的全部遗传信息。 二、RNA作为遗传物质 有些生物只有RNA和蛋白质组成,例如,某些动物病毒、植物病毒以及某些噬菌体。 1956年,H.Fraenkel-Conrat用含RNA的烟草花叶病毒TMV进行拆分与重组实验,证明了RNA也是遗传物质的基础。
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