植物生长调节物质诱导玉米9417育性转变机制概述.docVIP

　　植物生长调节物质诱导玉米9417育性转变机制概述 第一章 文献综述 1.1引言 玉米的环境适应性非常强，是一种重要的稳产作物，分布在世界的各个地区，其中北界可达北纬 45-48deg;，南到南纬 35-40deg;，除了南极洲以外，各大洲都可以种植玉米。玉米作为世界上最重要的粮食作物之一，其种植面积和总产量远远高于水稻和小麦，居于第三位（马兴立 2010）。因此，在粮食生产中占有的地位和作用是其它一些粮食作物无法比拟的。从大的方面来说，玉米不仅可以作为粮食消费，也是促进畜牧业和饲料业发展的原料供给，更重要的一点是，食品业和化学工业的发展也都与玉米息息相关（李冠军 2006）。玉米作为重要的种植资源，其产量和品质与人们生活的各个方面都是息息相关的。此外，人们把每个人所拥有的玉米数量看成该国家农业、牧业发达程度和人民生活水平高低的重要评价指标。原因是玉米作为一种非常丰富的种质资源，单位面积产量高，其最明显的一个特点就是玉米是 C4 植物，光合作用合成物质的能力高，呼吸作用分解的物质少，导致其净光合利用率高，增产效果明显，抗逆性很强，生产潜力非常突出（冯光明 1998）。 1.2植物生长调节物质的概念 植物生长调节物质是指能调节植物的生长发育和分化过程并且经过人工合成的具有生物活性的一类物质，其中许多生长调节物质的结构和功能与植物激素非常相似，而另一些与天然激素的化学性质和生理作用之间没有明显的关系，如植物生长延缓物质。从某种意义来说，生长调节物质也包括天然植物激素。目前，已发现具有调控植物生长和发育功能的物质有生长素、赤霉素、乙烯、细胞分裂素、脱落酸、油菜素内酯、水杨酸、茉莉酸和多胺等，而作为植物生长调节剂被应用在农业生产中主要是前 6 大类。植物生长调节剂与植物激素的区别主要为是否是植物自身产生的。一般来讲，生长素类、赤霉素类、细胞分裂素类都是促进植物生长发育的物质，乙烯主要是一种促进器官脱落的物质，脱落酸是一种抑制植物生长发育的物质（杨秀荣等 2007）。 1.3植物生长调节物质的种类及特点 植物生长调节剂（plant gro，株距30cm，施肥等按正常田间管理进行；玉米夏播，6月5-15日择机播种，行距60cm，株距30cm，施肥等按正常田间管理进行。采用上述 6 种试剂，分别于三叶期、拔节期、抽雄期、乳熟期进行田间试剂处理，处理方法为叶心注射和叶面喷洒，并且挂牌标记。以清水注射作为空白对照（CK），其它按照正常田间管理实施。每次处理 48h 后取样，封装、编号并保存于采样盒中迅速带回实验室进行相关生理指标的测定。取样时，必须从每种试剂处理的不同植株及植株不同部位的叶片进行取样，测定指标时先将取回样品清洗干净剪碎混匀后取一定量进行实验，这样做不仅可以保证其试验随机性，也能尽量减少因取材问题带来的结果误差。 2.2 育性鉴定 在玉米生长的不同时期使用6种植物生长调节物质对9417雄性不育系玉米进行叶心注射和叶面喷洒，其目的是诱导其分生组织分化发生逆转，观察9417不育两用系玉米在春播和夏播是否出现可育性状。具体就是从玉米抽雄期开始，观察玉米雄穗的生长发育情况，每隔一天记录一次其产生小穗和花药的雄穗的数目即统计玉米育性发生改变的株数，分析不育系玉米的可育性及可育度。一般主要采用光化学还原法（还原剂：氮蓝四唑）来测定 SOD 的活性（孙群 2006）。氮蓝四唑能够还原核黄素，还原后在有氧的条件下可以将 NBT 氧化为稳定的蓝色物质，根据反应液蓝色的深浅可以说明酶活性的高低，并且该蓝色物质在 560nm 处有最大的吸收值。具体方法：称取剪碎混匀的玉米叶片 0.5g 于预冷的研钵中，加入 2mLSOD 提取介质（pH7.8 50mmol/L 的 PBS 内含 1%PVP）在冰浴中研磨成匀浆，转移至 10mL 容量瓶中并定容至 10mL。取 5mL 提取液于 4℃、10,000rpm 下离心 15min，上清液即为 SOD提取液。选取透明度好，大小一致的试管 7 支，测定管和光下对照管各三支，暗中对照一支，用于调零。按照表 2-2 反应试剂的先后顺序加入到各个试管中。给 7 号试管加入核黄素后用黑色纸套遮光，待所有试剂加完后摇匀，置于光照培养箱内反应，根据光下对照管的颜色的变化控制反应时间。反应结束后，以 7 号管作空白调零，在该波长条件下测定吸光值，并代入公式计算可得 SOD 活性。 .. 第三章 不同植物生长调节物质处理对玉米30 3.1 试验材料处理 30 3.2 试验试剂及仪器 30 3.2.1 试验试剂的配制 30 3.2.2 蛋白胶的配制方法及用量 31 3.2.3 试验仪器 31 3.3 试验方法 31 3.3.1 玉米叶片蛋白的提取 31 3.3.2 SDS电泳 31 3.3.3 染色、脱色及照相 32 3.3.4