茶树ACC氧化酶基因全长cDNA的克隆与表达分析.pdfVIP

茶 叶 科 学 2o08，28(6)：459—467 Journnl0 jnscience 茶树ACC氧化酶基因全长 cDNA的克隆与表达分析 张亚丽 ，乔小燕 ，陈亮 (中国农业科学院茶叶研究所茶树资源与改 良研究中心，国家茶树改 良中心，浙江 杭州 3l0008) 摘要：AcC(1-氨基环丙烷．1．羧酸)氧化酶是植物 乙烯合成过程中的关键酶之一，对乙烯的合成具有重要的调控 作用。在茶树新梢 cDNA文库测序所获得 EsTs基础上，利用 RT-PcR技术，克隆得到编码AcC氧化酶基因 的全长序列，GenBank登录号为 DQ9O4328。该基因长 1232bp，编码 32O个氨基酸残基 ，预测分子量为 36．2kD， 等电点5．41。多序列联配表明茶树 Acc氧化酶具有高度保守区域，基于邻接法的进化树显示与柿树Acc氧 化酶的亲缘关系最近。对经高、低温后 的不同品种进行 RT—PcR分析 ，结果发现 AcC氧化酶基因的表达量与 品种的抗逆性有一定的相关性。 关键词：茶树；乙烯；ACC氧化酶；基因克隆；表达分析 中图分类号：s571．1；Q523 文献标识码：A 文章编号 ：1000—369x(2008)06—459—09 M OlecularCl0ningandExpressi0nAnalysis0nACC oxidaseGeneFull-lengthcDNA fr0m TeaPlant ZHANGYa—li，QIAOXia0一yan，CHENLiang (Researchcenterf0rTeaGermp1asmandImprovement，TeaResearchInstitutechineseAcademyofAgricu1tura1sciences，National Centerf0rTeaImprovement，Hangzhou3lOOO8，China) Abstract：1一aminocyclopropane一1一carboxylicacid(AoC)oxidase isan importantenzymeandplaysacritical regu1atOry rOlein the biOsynthesisOfethy1ene．Based On preViOusESTssequencingresu1tsOfthetendershoots cDNA libraryandRT-PCRtechnology，afull-lengthcDNA sequencecodingACCoxidase(AC0)ofteaplantwas cloned．TheGenBankaccessionisDQ9O4328intheNCBI．TheAC0genehad1232bpinlength，encoding320 aminoacidresidueswiththeputativemo1ecularwei tof36．2kD andthepI5．41．Theproteinsequencesofteaplant ACO aligned with th0seOfOther12p1antsshOwedhigh1y conserVatiVesequencesinteaplant．NeighbOr—Joining phylOgenetic treebased onAC0 sequenceofteap1antandother22plantsindicated thatteaplanthad veI。yc1ose relatiOnshipwiththatOfDfD yrD 七口七f．TheACO geneexpressionleVelOfdifferentcultiVarsafterhigh and 1ow temperaturestresseswereanalyzedusingRT—PCR method．TheexpressionlevelhascOrrelationwithresistanceOf thecultiVarstocenaindegree． Keywords：teaplant(I[ PZffa f，lP，lf)，ethylene，ACCoxidase，genecloning，expressionanalysis 乙烯作为一种气体激素，在高等植物体内 凋谢等。乙烯的生物合成由蛋氨酸在腺苷蛋氨 具有非