根癌农杆菌介导的水稻转化体系.pdfVIP

Vo1．38 No．3 稻 综 根癌农杆菌介导的水稻转化体系 刘永巍 ，田红刚 ，孟昭河 ，孟巧霞 ，李春光 ，张景龙 (黑龙江省农垦科学院 水稻研究所，黑龙江 佳木斯 154025) 摘 要：简要回顾了水稻转基因发展的历程；通过农杆菌介导法转化水稻的流程，分析了几种根癌农杆菌介导的日的基因 转化水稻的影响因素：农杆菌菌系及Vir基因的活化、水稻基因型和培养基种类、农杆菌侵染外植体的时间、共培养的方 式、共培养时间、选择标记与报告基因的选择、选择压；最后提出了水稻遗传转化中存在的问题及解决的方法。 关键词：水稻；转化；根癌农杆菌 中图分类号：S511．035．3 文献标志码：A 文章编号：1673～6737(2008)03-0011--04 Agrobacterium Tumefaciens——Mediated Transformation in Rice LIU Yong-wei，TIAN Hong—gang，MENG Zhao—he，MENG Qiao—xia，LI Chun—guang，ZHANG Jing—long (Rice Research Institute，Heilongjiang Academy of Farm Acclamation Sciences，Jiamusi Heilongjiang 1 54025，China) Abstract：The progress of genetic transformation in rice was reviewed and the factors influencing Agrobacterium tumefa— ciens—mediated target gene in rice was analyzed through the procedure，which include Agrobacterium tumefaciens strains and Vir gene activation，rice genotypes and medium types，infection time，CO—culture patterns，co-culture time，marker gene and reporter gene selection，selection pressure，and finally the problems existing in genetic transformation in rice and countermeasures were pointed out． Key words：Rice；Transformation；Agrobaeterium tumefaciens 水稻是人类重要的粮食作物，全世界约有1／3以上的 已在籼稻、粳稻和爪哇稻中获得了转基因植株。基因枪法 人l__1以稻米为主食。随着科技的进步，对水稻基因转化技 虽然使用方便，可转化多种组织和器官，但插人基因的拷 术的研究有了突飞猛进的发展，这归功于人类对植物基因 贝数往往较多，在后代中容易丢失、大片段基因难以导人、 结构、功能和表达有较为清晰的了解。近年来，应用基因工 实验成本高。 程技术导人外源有利基因已创造出一批抗病、抗虫、抗逆 自1983年Zambrysui等人利用农杆菌转化烟草获得 的水稻新品种、新品系。目前，水稻转基因的方法有：PEG 首例转基因植物以来，农杆菌介导的转化方法已在双予叶 法(聚乙二醇法)、脂质体法、显微注射法、电击法、激光微 植物中进行了广泛的应用。由于单子叶植物 是农杆菌的 束法、超声波法、花粉管通法、基因枪法、农杆菌介导法等 天然寄主而对其反应不敏感，曾一度限制 r它在单子叶植 等。其中以后两种方法应用较多，尤其是农杆菌介导法，随 物中的应用。进人20世纪90年代以来，随着人们对农杆 着研究的深人，转化效率的提高，已经成为越来越多科研 菌侵染机理的了解和转化技术的改进，相继在多种甲予叶 人员培育新品种的有效方法。然而，