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第23卷 第2期 河 北 林 果 研 究 V01．23 No．2
2 0 0 8年6月 l{口衄IEI JOIIRNAI 0lF )RE! mY AND o】R( ARD 【CH JUn．2008
文章编号：1007．．4961(2oos}o2—0118—05
胡杨根、茎、叶、愈伤组织总RNA提取的研究
严晓丹 ，王天祥 ，刘挨枝 ，王华芳
(1北京林业大学生物科学与技术学院，北京 100083；2内蒙古额济纳胡杨林国家级自然保护区管理局，内蒙古 010019)
摘要：胡杨根、茎、叶、愈伤组织等器官和组织的总RNA高质量提取是进行以胡杨RNA为基础的分子生物学
研究的基础。以2 a生胡杨实生苗根系为材料，用CrAB—PvP提取缓冲液裂解细胞并变性蛋白，经氯仿／异戊
醇(24：1，v／v)抽提后，用3种不同的沉淀方法获得胡杨根系总RNA，电泳和定量测试等分析提取质量。结果表
明，LiC1沉淀法结合70％乙醇洗涤沉淀两次获得的的胡杨根系总RNA，条带清晰、亮度高，且没有明显的DNA
污染；actin基因片段设计引物对胡杨根系总RNA进行RT—PCR扩增，扩增片段与预期大小一致，表明该RNA
可用于逆转录合成eDNA，提取物RNA中的Ij 残留对逆转录酶活性的抑制作用不明显；该方法用以提取2 a
生胡杨实生苗茎、叶及愈伤组织总RNA，均获得高质量总RNA。CrAB—PVP—LiCI(附70％乙醇洗涤RNA沉淀
2次)的方法可用于胡杨根、茎、叶和愈伤组织总RNA的提取。
关键词：胡杨；根系；RNA提取
中图分类号：S 792．119 文献标识码：A
Extraction of total RNA from roots，stems，leaves and calli
of Populus euphratica Oliv．
YAN Xiao．dan ，WANG Tian．xiang ，LIU Ai．zhi2，WANG Hua．fang
(1 College ofBiological 5c and Biotechnology，Beijing Forestry University，Beijing 100083，China；
2 National Nature Preservation Area ofPopulus diversifolia in 腿，
Inner Mongolia Autonomous Region 010019，China)
A~trad：The quality oftotal RNA isolated from roots．stems．1eaves and ealli of Populus euphratica Oliv is the foundation of
gene expression related researches using the RNA．In this paper．seedling roots of two-year-old P．euphratica were used as
test materials，and CrAB—PVP extracting buffer was developed in order to break up organ cells and denaturalize proteins，and
three deposition method were used to deposit 1LNA after the Chlomfomrqsoamyl alcohol(24：l，v／v)extraction，then ana—
lyzed the RNA qualities b
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