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上海翊圣生物科技有限公司 客服热线：400-6111-883 E-mail: order@ HB170331 TM ® Hieff qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus) 产品信息 产品名称 产品编号 规格 储存 HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix (High Rox Plus) 11203ES03 1ml -20 ℃避光 HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix (High Rox Plus) 11203ES08 5×1ml -20 ℃避光 产品描述 HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix(High Rox Plus)是2×实时定量PCR 扩增的预混合溶液。Mix 中含有热启动HieffTM DNA Polymerase 、SYBR® Green I 、dNTPs、Mg2+及High Rox 。使用时，仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行实时荧 光定量PCR ，大大简化操作过程，降低污染几率。 本品采用的DNA 聚合酶配体可以随温度变化实时调节DNA 聚合酶活性。配方添加了有效抑制非特异性PCR 扩增的因 子和提升PCR 反应扩增效率的因子，使定量PCR 可以在宽广的定量区域内获得良好的线性关系。 适用机型 Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT FAST, StepOneTM, StepOne PlusTM. 反应体系 （推荐冰上配制） 组分 体积（μl） 体积（μl） 终浓度 HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix (High Rox Plus) 25 10 1× Forward Primer (10μM) 1 0.4 0.2μM Reverse Primer (10μM) 1 0.4 0.2μM 模板DNA X X - 无菌超纯水 to 50 to 20 - 【注】： 使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。 a) 引物浓度：通常引物终浓度为0.2μM，也可以根据情况在0.1-1.0μM之间进行调整。 b) 模板浓度：1µg RNA 的反转录产物需要稀释10 倍左右，以减轻RNA 对PCR 扩增的抑制。 c) 反应体系：推荐使用20μl或50μl，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。 d) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染 和气溶胶污染。 扩增程序 （本产品可适用三步法和两步法程序） 三步法程序 循环步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 5min 1 变性 95℃ 10sec