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关于微生物对养殖水体脱氮探究摘要：养殖水体中氨氮浓度的控制一直是水产养殖工作者研究和探索的问题，高浓度的氨氮不仅直接危害养殖生物，还会引起养殖动物发生病害。本文通过研究放线菌，枯草芽孢杆菌对养殖水体脱氮方面的特性，根据全自养脱氮理论将放线菌和枯草芽孢杆菌共同作用于养殖水体，发现可以部分地实现对养殖水体的全自养脱氮。 关键词:全自养；氨氮；亚硝酸盐氮；脱氮 中图分类号：Q93-335文献标识码：A 文章编号：1009-9166（2008）10-0061-01 一、材料与方法：1、菌种与培养基放线菌：细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)由山西大学现代化学研究所生物化工实验室分离保藏。放线菌用高氏（Gause）1号培养基：可溶性淀粉20g，KNO3 1g，K2HPO40.5g，MgSO4 0.5g，FeSO40.01g，琼脂20g，水1000ml，pH7.2-7.4。枯草芽孢杆菌用牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂15-20g，水1000ml，pH7.0-7.2。2、实验水样的预处理：实验水体取自太原市晋阳湖，用5000ml大三角瓶盛装。由于其中有机氮含量低，向水样中加入足量的蛋白质鱼粉，在30℃下放置5d左右使水体产生较高浓度的氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮。向经预处理的实验水样中接入供试菌，实验对照不接菌。定时测定其中的微生物菌数，氨氮含量，硝酸盐氮含量，亚硝酸盐氮含量，溶解氧和pH值。室温下培养(25-31℃）。3、微生物培养方法：将枯草芽孢杆菌，放线菌分别接种于相应的固体培养基平板上于37℃恒温培养24-36h，活化后，分别接种于对应的液体培养基，于37℃恒温摇床培养36-48h。4、水质测定方法：氨氮含量采用纳氏比色法测定，硝酸盐氮用酚二磺酸光度法测定，亚硝酸盐氮含量采用奈氏比色法测定，pH采用精密pH试纸测定，溶解氧(OD)采用碘量法测定，菌数采用平板菌落计数法测定。 二、结果与分析：1、微生物的最适生长条件的确定。根据试验方法，放线菌，枯草芽孢杆菌三菌株在养殖水体水样中的最适生长条件进行研究，结果见表1。 由表1结果可知，放线菌和枯草芽孢杆菌为好氧菌，其生长要求水体中有一定的溶解氧。2、放线菌对水体的脱氮作用；由图1可知，氨氮去除较彻底；但同时亚硝酸盐氮积累，在120h时达到最大值1948.058mg/L，比初试浓度增加42.0%。因此，放线菌对养殖水体的脱氮作用为氨化作用和自养亚硝化作用。3、枯草芽孢杆菌对水体的脱氮作用； 图1放线菌对水体的脱氮作用，图2枯草芽孢杆菌对水体的脱氮作用由图2可知，氨氮、亚硝酸盐氮浓度分别下降57.8%、81.3%，硝酸盐氮浓度变化很小。由此可知，枯草芽孢杆菌对养殖水体的脱氮过程中氨氮去除率比较高且亚硝酸盐氮积累很少，脱氮作用应该为自养亚硝化和自养反硝化作用，即全自养脱氮，但枯草芽孢杆菌对氨氮的去除率远不如光合细菌和放线菌彻底。4、微生物对水体全自养脱氮作用。将放线菌、枯草芽孢杆菌按不同比例接入水体，其脱氮效果如表2. 由表2结果可知，放线菌与枯草芽孢杆菌以不同的接种比例接入水体，对氨氮的去除率、亚硝酸盐氮去除率差别不明显，比例为1：1时，水体中氨氮、亚硝酸盐氮的去除率达到最大值，分别为69.2%、59.9%；比例为3：1时，水体中氨氮、亚硝酸盐氮的去除率达到最小值，分别为42.7%、42.3%。由表1可知，放线菌与枯草芽孢杆菌都是好氧菌，其生长都要求水体中有一定的溶解氧，因此，放线菌与枯草芽孢杆菌混合菌液的脱氮作用可以部分地实现全自养脱氮的目的。 三、讨论 水体富营养化是我国当今水环境面临的重大问题，如何经济有效地去除水中的氮，是解决水体安全的重要课题。目前最有效、应用最广泛的脱氮方法是生物脱氮工艺，其中比较成熟的是传统硝化―反硝化工艺。全程自养脱氮反应主要是通过脱氮自养菌来进行的，应用于全自养脱氮的细菌主要为亚硝酸菌和厌氧氨氧化细菌，但亚硝酸菌和厌氧氨氧化细菌生产速率十分缓慢，它的培养富集很困难(至少耗时数月)，国内外已报道能富集培养或成功启动厌氧氨氧化细菌或工艺的寥寥可数，所以目前对厌氧氨氧化的反应机理、动力学及微生物方面的研究很大程度上都尚处于推测阶段，要对该现象有较深入的了解还需要进行很多的研究工作。 本文通过研究放线菌、枯草芽孢杆菌对高浓度含氮水体的脱氮作用，试验结果发现，放线菌和枯草芽孢杆菌组合都对水体有全自养脱氮作用，基本实现了对水体的全自养脱氮。 作者单位：天津生物工程职业技术学院 参考文献： [1]罗国芝,刘艳红,谭洪新,朱学宝.新建海水生物滤器接种培养的研究[J].农业环境保护.2001