乙型肝炎及肝硬化患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体检测.docVIP

乙型肝炎及肝硬化患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体检测抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil cytoplastic antibodies,ANCA）代表了一组与中性粒细胞胞浆成分反应的自身抗体，对活动性 Wegener肉芽肿的诊断有较高的敏感性和特异性[1]，是疾病活动的标志，现可见于很多原发性炎症性疾病。目前，临床上ANCA的血清学检测主要用于WG、快速进行性肾小球肾炎、多发性动脉炎（polyarteritis）、溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）和原发性硬化性胆管炎（primary sclerosing cholangitis,PSC）及克罗恩病的实验室诊断。本研究观察乙型肝炎和肝炎后肝硬化ANCA的表达情况及与肝炎活动的关系。 1 对象与方法 1．1 对象 选取 2005年8月至2006年12月在我院就诊的乙型肝炎后肝硬化患者80例，男54例，女 26例，年龄25～76岁，平均49岁。均系住院患者，经临床、实验室及影像学检查确诊；乙型肝炎患者75例，男 55例，女20例，年龄 20～68岁，平均37岁，按 1995年第五次全国病毒性肝炎诊断标准[2]确诊。健康对照组48例，男28例，女20例，年龄25～60岁，平均31岁，均为我院健康体检者。所有患者空腹采血，分离血清标本-80℃保存待检。 1．2 方法 血清 ANCA的测定：采用间接免疫荧光法 (IIF)，试剂由德国欧蒙公司提供。待检血清用PBS 1∶10稀释，每批均设阴阳性对照，每孔加25 u1的血清到基质上，37℃孵育30 min，PBS洗涤1次，5 min，加荧光二抗，37℃孵育30 min，洗涤同上，缓冲甘油封片。 结果采用LAICA荧光显微镜进行观察。ALT、AST用Roche P800 全自动生化仪检测，采用罗氏德国原装试剂。正常值：ALT 0～50 U/L，AST 0～40 U/L。 1．3 统计学方法 应用统计软件 SPSS 10．0版进行数据处理，配对计算检验和两个独立样本的 t检验。 2 结果 乙型肝炎后肝硬化组ANCA阳性率 43．75％(35／80)，明显高于乙型肝炎组的 13．33％ (10／75，P0．000 1)和健康对照组的0％(P0．000 1)，且肝硬化组均为c-ANCA型。肝硬化患者中ANCA阳性组血清ALT和AST高于ANCA阴性组，差异有统计学意义（P0．05），见下表1。 3 讨论 3．1 我国是乙型肝炎高发区，乙肝感染后肝硬化的发生机制是近年来研究的重点。有文献报道慢性病毒性肝炎、肝癌患者血清中能检测到自身抗体[3]，因此自身免疫在病毒性肝炎病情发展及癌变中的作用受到研究者的重视。且随着肝病的恶化，检出率逐渐升高。ANCA是系统性坏死性血管炎的血清学标志，存在于多种自身免疫性疾病中。近年来研究已证实此自身抗体也存在于部分肝炎患者的血清中，且在部分自身免疫性肝炎患者中有较高的阳性率[4]。我们的研究结果是，在乙型肝炎患者血清中ANCA阳性率13．33%高于健康对照组,而在肝硬化期患者阳性率达43．75％，明显高于乙型肝炎组和健康对照组,差异有统计学意义 (P0．05)，且均为 c-ANCA型。这一结果符合上面的观点，但其自身免疫反应在病毒性肝病中是如何被启动的，以及自身抗体在病毒性肝炎的发展及转归中的作用还有待进一步的研究。 3．2 ANCA是针对中性粒细胞主要颗粒成分和单核细胞溶酶体的一类自身抗体，按其荧光类型可分为c-ANCA 和 p-ANCA型。c-ANCA为胞浆型，即中性粒细胞呈弥漫型荧光，主要靶抗原为蛋白酶3。p-ANCA为核周型，即中性粒细胞核周围出现荧光，其主要靶抗原为髓过氧化物酶。大量研究表明，在许多原发性炎症性疾病如类风湿关节炎、炎症性肠病、结缔组织病及感染性疾病等均可出现ANCA。 ANCA相关性疾病的发病机制较为复杂，涉及 ANCA、致炎因子、内皮细胞及其他免疫效应细胞的相互作用。本研究发现在肝硬化患者 ANCA阳性组，ALT、AST明显高于ANCA阴性组，肝功能损伤较ANCA阴性组重。说明ANCA的表达可能与肝炎活动、肝功能损伤有关。慢性HBV感染容易诱发自身免疫，ANCA阳性可能也是 HBV感染者产生的一种自身免疫现象，ANCA阳性表达与肝硬化的预后是否有关尚需进一步研究。ANCA相关性疾病的发病机制较为复杂，涉及 ANCA、致炎因子、内皮细胞及其他免疫效应细胞的相互作用，仍需大量研究工作探清其详细机制。 参考文献 1 Davies DJ,Moran JE,Niall JF,et al.Segmental necrotising glomerulonephritis with an tineu