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免疫浊度研究中钩状效应防范讨论【关键词】 免疫浊度分析；钩状效应 在免疫浊度分析中，抗原、抗体形成的沉淀量起初随着样本浓度的增加而增加，但当样本浓度过高时，沉淀量随着样本浓度的增加反而减少，使反映信号弱化，信号-剂量（浓度）曲线呈钩状现象，而仪器是据沉淀量蝉翼的浊度计算结果的，因此当样本浓度过高，测出的结果必然不准确。为此，我们以ApoA1为例，通过对仪器试剂测量范围极限值上限和仪器自动稀释重做功能进行设置，探讨免疫浊度分析中钩状效应的防范。 1 材料与方法 1.1 材料 选取我院2004年4～12月门诊及住院样本中ApoA1超过测量范围上限的样本12例。仪器及试剂采用OLYMPUS AU400生化分析仪和浙江伊利康生物技术有限公司试剂(批号：04112)。校准液及质控品采用浙江伊利康生物技术有限公司校准液(批号：04112)和北京中生北控物公司质控产品(批号：022321)。 1.2 方法 1.2.1 仪器校准 每周用伊利康校准液对OLYMPUS AU400生化分析仪校正1次。 1.2.2 质量控制 中生公司控品在OLYMPUS AU400上每日进行室内质控，用平时建立的质控图对质控结果进行监测，当质控结果符合要求后方可开始本样本测定。 1.2.3 实验方法 首先对仪器的试剂测量范围上限和仪器自动稀释重做功能进行设置，然后对设置前超过测量范围上限的样本进行设置前后测定值比较并进行配对资料的符号秩和检验。 1.2.4 仪器设置 ApoA1试剂测量范围极限值（Dynanic）上限设为2.20，自动重复（Auto repeat）和重复数据覆盖（Repeat Data Overwrite）都选择Yes，稀释或模式（Diluted OR Mode）中选中F，特殊重复（Repeat special）中实验项目（Test Name）选择为ApoA1,稀释（Diluted）样本体积（Sample Volume）仍设为2，系统（System）下试验申请（Test Requisition）中常规（Routine）设为架子编号方式（Rack NO.），自动/标准重复（Auto/Standard Repeat）设为Auto。 1.3 统计学处理 数据比较采用秩和检验和t检验。 2 结果 对仪器试剂测量范围极限值上限和仪器自动稀释重做。 对样本仪器设置前后测定值进行配对资料的符号秩和检验，其差异有统计学意义（P＜0.05＝，仪器设置后测定组与设置前且人工对倍稀释测定组测定值进行配对资料t检验，其差异无统计学意义（P＞0.05）。 3 讨论 试剂的检测范围是0.50～2.20 g/L，当样本浓度超过2.20 g/L时检测出现钩状效应，则应将样本人工或仪器自动做1∶1稀释后测定，因此将测量范围极限值上限设为2.20 g/L，本研究主要探讨仪器自动稀释功能。当测定样本浓度大于4.40 g/L时，即使通过仪器自动稀释（因设置对倍稀释）后的测定样本浓度让大于测量范围极值上限2.20 g/L的检测同样存在钩状效应，因此，当样本浓度高于4.40 g/L，通过仪器自动稀释功能测定的样本结果与样本真值之间仍存在较大的差异，此时必须加大样本的稀释倍数。 通过对仪器设置前超过测量范围上限的样本进行设置前后测定值比较可知，ApoA1低于4.40 g/L的样本在仪器设置前后测定值差异有统计学意义（P＜0.05）；通过对仪器设置后测定组与设置前且人工对倍稀释测定组测定值无统计学意义（P＞0.05）及免疫浊度分析原理可知，设置后测定组比设置前测定组样本测定值更接近样本真值。 通过仪器的设置，浓度低于4.40 g/L的ApoA1样本，仪器均可以自动测定，不需要每个样本专门添加复原来检测是否存在钩状现象，不用在仪器不报警的情况下人工检查结果或结果标记，不用人工稀释样本，操作简便、准确。 “本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文” 1