毛细管气相色谱法测定硫酸长春新碱中有机溶剂残留量方法学.docVIP

毛细管气相色谱法测定硫酸长春新碱中有机溶剂残留量方法学[摘要]目的：建立测定硫酸长春新碱有机溶剂残留的毛细管气相色谱法。方法：采Agilent DB-WAX弹性石英毛细管柱（0.320 mm×30 m×0.23 μm）,测定硫酸长春新碱中的甲苯、三氯甲烷、乙醇三种有机溶剂残留量。结果：甲苯、三氯甲烷及乙醇三种有机溶剂的极性相差较大，在有限的时间内不易同时测定，采用梯度洗脱方法可在15 min内全部分离测定，且分离度、精密度、回收率等均符合要求。结论：本方法简便快捷，可用于测定硫酸长春新碱中的甲苯、三氯甲烷、乙醇等有机溶剂残留量的检测。 [关键词]长春新碱；气相色谱法；有机溶剂残留量；甲苯；三氯甲烷；乙醇 [中图分类号] R927.11[文献标识码]A [文章编号]1674-4721（2009）05（a）-０27－０2 长春新碱是由英竹桃科植物长春花中提取的生物碱，在临床抗癌治疗中应用十分广泛，尤其在白血病、淋巴癌、肾肿瘤和神经母细胞瘤治疗中经常使用[1]。本文采用毛细管气相色谱法对3种有机溶剂进行测定和验证，方法简便，精密度较高[2]。 1资料与方法 1.1 仪器与试药 岛津GC-14C型气相色谱仪、GHL-300型氢气发生器，WJK-6型全自动净化空气源。甲苯、三氯甲烷、乙醇（广州化学试剂厂，分析纯）、二甲亚砜（DMSO）（色谱纯，TEDIA COMPANY，INCUSA）。硫酸长春新碱(海南长春花药 业有限公司生产，批20051105。 2 方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：Agilent DB-WAX弹性石英毛细管柱(0.320 mm×30 m×0.23 μm)，检测器：氢火焰离子化检测器(FID)，温度240 ℃，载气氮气，进样口温度220 ℃，柱前压200 kPa，进样量：1μl。程序升温：35℃保持4.6 min，以20 ℃/min升至155 ℃，保持3 min，再以20 ℃/min升温至190 ℃，保持1 min。 2.2 对照品溶液的配制 精密量取甲苯0.346 4 g、三氯甲烷0.022 2 g、乙醇1.975 0 g，分别置25 ml量瓶中，加二甲基亚砜（DMSO）稀释至刻度，分别量取5 ml，置同一50 ml量瓶中，加DMSO稀释至刻度，为混合对照品溶液0号。 2.3 系统适应性试验 取对照品溶液按“ 2.1”项下条件测定，3种溶剂峰的分离度良好。 2.4线性试验 精密量取“2.2”项下0号混合对照品溶液适量，按下表分别以DMSO稀释制成系列浓度的标准溶液，依法测定，结果见表1。 以各组分浓度C (mg/ml)为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表2。 结果表明甲苯、乙醇、三氯甲烷在相应的线性范围内线性关系良好。 2.5精密度试验 取“2.4”项下的2号混合对照溶液, 重复进样6次,结果见表3。 结果精密度符合中国药典[3]的有关要求。 2.6回收率试验 取本品约0.4 g，精密称定，置10 ml量瓶中，分别加入上述 “2.4”项下的5号对照品溶液4、5、6 ml，以DMSO溶解并稀释至刻度，制成三种不同浓度的溶液。每种浓度的溶液各制3份。分别进样测定，按外标法以峰面积计算得3种有机溶剂的平均回收率，结果见表4。 2.7 最低检出限 取上述 “2.4”项下的4号混合对照溶液,按不同稀释倍数稀释至各对照品响应值为基线噪音响应值的2~10倍，测定并计算乙醇、三氯甲烷及甲苯3倍于噪音响应值时的最低检出限，结果见表5。 根据中国药典有关规定，药物原料中甲苯、三氯甲烷及乙醇的残留限度为不得过0.089%、0.006%及0.5%[3]。按样品溶液制备方法（0.4 g相当于5.0 ml）折算成规定样品溶液浓度（g/ml）分别为不得过71.2 μg/ml、4.8 μg/ml及400 g/ml，除三氯甲烷的规定限度仅为检出限的2.2倍而无法定量测定外,乙醇和甲苯的规定限度均远高于检测 限,并符合定量检测要求（即响应值应为噪音响应值的10倍以上）。 3讨论 3.1溶剂的选择 待测的有机溶剂既有水溶性溶剂又有水难溶性溶剂，如以水为溶剂需要大量地稀释并超声波助溶处理[4]。经试验，本品及残留的有机溶剂在DMSO中均能很好溶解，因此采用DMSO为溶剂。 3.2色谱柱的选择 甲苯、三氯甲烷及乙醇三种有机溶剂的有机溶剂的极性相差较大，在有限的时间内不易同时测定[5]，采用梯度洗脱方法可在15 min内全部分离测定，且分离度、精密度等均符合要求。 [参考文献] [1]