SPE-HPLC测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb含量.doc

SPE-HPLC测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb含量【摘要】目的：建立固相萃取-高效液相色谱法测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。 方法：色谱柱Dikma Kromasil C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm），流动相甲醇?水（80∶20），流速0.8 ml/min，检测波长250 nm，柱温40℃。 结果：醉鱼草皂苷Ⅳb在0.7715～6.136 μg范围内具有良好的线性关系（r＝0.9999），平均回收率为98.57％，RSD为0.56％（n＝9）。 结论：该方法简便、快速、有效、灵敏、准确，具有良好的重复性和回收率，可作为该制剂的定量分析方法。 【关键词】固相萃取法；高效液相色谱法；断血流片；醉鱼草皂苷Ⅳb；含量测定 文章编号：1009-5519（2007）17-2534-02 中图分类号：R9 文献标识码：A Determination of the content of buddlejasaponins Ⅳb in duanxueliu tablet by HPLC ZHANG Lei，HE Bing (Luzhou Medical College，Luzhou 646000，China) 【Abstract】Objective：To establish a method for the content determination of buddlejasaponins Ⅳb in duanxueliu tablet by solid phase extraction and HPLC． Methods：The separation was carried out on a Dikma Kromasil C18 column(5 μm，250 mm×4.6 mm)；The mobile phase was methanol-water（80∶20）；The flow rate was 0.8 ml/min；The detective wavelength was set at 250 nm；The column temperature was 40 ℃．Results：The calibration curve showed good linearity over the range of 0.7715～6.136μg（r＝0.9999）. The average recovery was 98.57％ with RSD 0.56％（n＝9）．Conclusion：This method was simple，rapid，efficient，sensitive and accurate,with good repeatability and recovery，it could be used as a quantitative analysis method for this preparation． 【Key words】SPE；HPLC；Duanxueliu Tablet；Buddlejasaponins Ⅳb；Content determination 断血流片是由断血流浸膏制成的片剂，具有凉血止血之功效。主要用于功能性子宫出血，月经过多，产后出血，子宫肌瘤出血，尿血，便血，吐血，咯血，鼻出血，单纯性紫癜，原发性血小板减少性紫癜等。本品收载于《中国药典》（2005版），其质量标准中含量测定采用液液萃取以除去杂质成分，但操作过程复杂费时。我们采用固相萃取法（SPE）纯化断血流片的样品液，再用高效液相色谱法（HPLC）法测定片中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。该方法比较简单快速，重现性好，具有良好的重复性和回收率，可用于改善该制剂的质量标准。 1 仪器与试药 1.1 仪器：戴安高效液相色谱仪（P680A四元低压梯度泵，PDA-100二极管阵列检测器，TCC-100柱温箱，Chromeleon色谱工作站）；HSE-12固相萃取装置（天津恒奥科技发展有限公司）；固相萃取小柱（Besep SPE Column，C18，500 mg/6 ml）；瑞士Precisa电子天平（XR 205SM-DR）；CQX25-06超声波清洗器（上海必能信超声有限公司，功率250W，频率25 kHZ）。 1.2 对照品：醉鱼草皂苷Ⅳb（110782-200301），中国药品生物制品检定所提供。在选定色谱条件分离后按面积归一化法计算含量为98.36%，符合含量限度要求，故含量以100%计算。 1.3 试药：甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯水为重蒸馏水。 1.4 样品：断血流片，安庆乘风制药有限公司，批号：0504081， 0505102，0506181。