Survivin在子宫内膜异位症组织中表达及意义.doc

Survivin在子宫内膜异位症组织中表达及意义[摘要] 目的：探讨子宫内膜异位症（EMs）组织中Survivin表达及临床意义。方法：选取EMs患者的异位内膜组织35份和在位内膜组织32份及正常子宫内膜组织26份，采用S-P法测定Survivin表达。结果：EMs异位和在位内膜组织中Survivin的表达显著高于正常内膜组（P＜0.05），且异位内膜组Survivin的表达也显著高于在位内膜（P＜0.05）。结论：Survivin在EMs发病机制中起重要作用。 [关键词] 子宫内膜异位症；Survivin [中图分类号] R711.71 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）06（b）-022-02 子宫内膜异位症（EMs）是妇科常见病，占生殖年龄妇女的7％～50％。EMs虽为良性疾病却具有侵袭、种植和复发等“恶性”生物行为，这些特征发生可能与凋亡调控基因有关[1]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员，能直接与Caspase－3和Caspase－7结合并抑制其活性而阻止细胞凋亡；还可通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖。本研究旨在探讨EMs与Survivin表达关系及临床意义。 1材料与方法 1.1研究对象 选取我院妇科2003年5月～2005年10月手术治疗且术后病理确诊为EMs 35例为研究组，通过手术取得35份卵巢子宫内膜异位病灶组织及32份在位内膜组织。对照组26例，为同期子宫肌瘤手术患者正常子宫内膜组织。两组患者月经周期规律，无内科合并症，术前3个月内未用过激素治疗。两组年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 1.2主要试剂 Survivin鼠抗人单克隆抗体，S－P广谱超敏试剂盒，DAB酶底物显色剂等均购自北京中山生物技术有限公司。 1.3方法 1.3.1标本制备开腹手术时取得的正常子宫内膜组织，卵巢子宫内膜异位及在位组织，立即用10％缓冲甲醛固定，常规脱水及石蜡包埋苏木精-伊红染色后，光镜下观察筛选组织标本备用。 1.3.2实验方法石蜡标本连续切片，片厚4 μm，贴于载玻片上，置于烤箱（80℃），10 min后取出，切片脱蜡至水，进行抗原修复处理，按免疫组化S-P法测定，染色步骤参照说明书进行，以PBS代替一抗做阴性对照。 1.4结果判定 Survivin免疫组化阳性产物呈棕黄色细颗粒状，定位于细胞浆，综合染色强度和分布范围判定结果。按染色程度计分：无色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。镜下观察随机选取10个不同高倍视野，计数1 000个细胞，按阳性细胞所占百分比分为：1％～10％ 1分，11％～50％ 2分，51％～80％ 3分，≥81％ 4分。对阳性细胞百分比及染色程度评分，两者乘积≥3分者为阳性。 1.5统计学分析 应用SPSS 11.0统计分析软件进行χ2检验分析数据。 2实验结果 在26例正常子宫内膜组织、32例EMs的在位内膜及35例异位内膜组织中Survivin表达阳性率分别为19.23％、43.75％、68.57％。在位和异位内膜组Survivin表达显著高于正常内膜组（P＜0.05)，且异位内膜组Survivin表达也高于在位内膜组（P＜0.05）（表1）。 3讨论 最新研究显示，凋亡是子宫内膜细胞保持周期性结构和功能稳定的关键因素[2]，正常子宫内膜周期性增生和脱落，是通过细胞增殖和凋亡方式实现的，异位内膜细胞在宫腔外种植并持续存活，与其对凋亡的抵抗力增强有关。Harada等[3]在研究EMs在位及异位内膜与正常子宫内膜对凋亡敏感性的实验中发现患者在位及异位内膜对凋亡敏感性均明显下降，异位者较在位者下降更明显，且无周期性变化，从而推测内膜组织对凋亡敏感性下降可能是引发EMs的一个原因。 Survivin是新近发现的一种凋亡抑制蛋白家族成员，其特异性表达于人和鼠的胚胎组织以及多数人类肿瘤细胞，在正常成人组织的表达仅见于胸腺、睾丸和分泌期子宫内膜[4]。已有研究表明，Survivin不仅抑制细胞凋亡，还参与血管形成，其表达可能调节生理性血管修复或病理性（肿瘤）血管形成，对肿瘤细胞的浸润、迁徙起重要作用。Ueda等[5]研究发现，Survivin在异位内膜中的表达较正常子宫内膜明显升高，并与EMs分期、月经周期无关。 本研究采用免疫组化方法检测正常子宫内膜和EMs在位及异位内膜组织中Survivin的表达，结果发现EMs在位及异位内膜组织中Survivin的表达显著高于正常子宫内膜组，且异位内膜的Survivin的表达也高于在位内膜组。这表明Survivin在EMs发病机制中起重要作用，EMs的发生有赖于异位内膜细胞的种植，而EMs在