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南瓜茎中黄酮类化合物提取工艺优化[摘要]采用乙醇溶液提取南瓜茎中总黄酮，通过单因素试验和正交试验研究了固液比、提取时间、提取温度和乙醇浓度对黄酮类化合物提取率的影响。结果表明，最优提取条件为：固液比1∶20，提取时间4 h，提取温度80℃，乙醇浓度50%。 [关键词]南瓜茎；总黄酮；提取；乙醇 [中图分类号]R91 [文献标识码]B[文章编号]1673-7210（2007）06（a）-127-02 黄酮属于酚类化合物，植物中的黄酮大体上可分为“黄酮类”与“黄烷酮类”两大类物质。黄酮具有多种药理作用，其中包括：抗氧化作用、消炎作用、抗癌和抗基因诱变作用[1-3]。大多数黄酮类物质的化学结构属于“二丙基丙酸类”，系由植物自身所合成。随着研究的深入，科学家逐渐认识到：蔬菜、水果中的植物黄酮对人体健康有无可替代的重要作用。 南瓜,又称番瓜、金冬瓜，葫芦科南瓜属一年蔓生草本植物，其适应性强，耐贫瘠土壤，有较强的抗旱力，因而在全国各地广有种植，更是人民大众日常餐桌上一道常见的蔬菜。南瓜营养丰富，富含果胶、胡萝卜素、戊聚糖、甘露糖、多种氨基酸、维生素、矿物质及生物碱、南瓜子碱、葫芦巴碱等有益生理活性物质。南瓜食品是世界上公认的特效保健食品，对南瓜进行一般营养素分析证明它是一种营养丰富的食品。在我国古代民间就有了对南瓜食疗保健作用的记载[4]，但是人们食用南瓜，而南瓜茎则扔掉造成大量浪费。本研究以南瓜茎为原料，以乙醇为溶剂从南瓜茎中提取黄酮类物质，探讨研究提取率的主要因素。 1 材料与仪器 1.1 原料及试剂 南瓜茎：取南瓜茎经100℃水蒸气固定2.5 min，70℃干燥12 h，研磨后经过0.25 mm金属网筛，将烘干样品放入磨口广口瓶，置于干燥器中保存，备用。 NaNO2，Al(NO3)3，NaOH，95%乙醇均为分析纯。 芦丁标准品属于生化试剂，上海试剂一厂生产。 1.2 仪器 UV-VIS 8500紫外可见分光光度计：上海天美科学仪器有限公司生产， JA1203 电子天平:上海精科天平厂生产，电热恒温水浴锅：江苏省医疗器械厂生产，DZF-6021型真空干燥箱：上海精密试验设备有限公司生产，RE-52AA型旋转蒸发仪、上海亚荣生化仪器厂生产，SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵：巩义市英峪予华仪器厂生产。 2 方法 2.1 黄酮测定方法原理 以芦丁为对照品测定南瓜茎总黄酮含量，加入铝离子试剂使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光内获得稳定吸收峰。 2.2 标准曲线的制备 精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品100 mg，置50 ml 容量瓶中，加50%乙醇约30 ml，置水浴上微热使溶解，放冷，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取10 ml，置100 ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得0.200 mg/ml的标准溶液。精密量取标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml 与6.0 ml，分别置25 ml 容量瓶中，各加水至6 ml，加5%亚硝酸钠溶液1 ml，使混匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 ml，混匀，放置6 min，加氢氧化钠试液10 ml，再加50%至刻度，混匀，放置15 min，在512 nm 的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。 2.3 南瓜茎中黄酮提取率的测定 准确称取南瓜茎干粉10 g，不同条件下浸取，浓缩干燥，得到南瓜茎黄酮提取物，同上述方法进行测定。 芹菜黄酮提取率（mg/g）=稀释倍数×C×V/10 3 结果与讨论 3.1 固液比对提取率的影响 称取南瓜茎干粉10 g，在乙醇浓度为50%，提取时间为1 h，提取温度为60℃条件下，不同固液比对南瓜茎总黄酮提取率的影响见图1。 由图1可以看出，随着固液比的变化，浸取液比例越大，南瓜茎中总黄酮的得率也越大，当固液比达到1∶20以后，黄酮的提取率曲线增长变得平缓，变化不明显。 3.2 时间对提取率的影响 称取南瓜茎干粉10 g，在固液比1∶25，乙醇浓度为50%，提取温度为60℃条件下，不同提取时间对南瓜茎总黄酮提取率的影响见图2。 由图2可以看出，随着时间的延长，南瓜茎中总黄酮的得率有所增加，但并不是很显著，2 h以后曲线趋于平缓，得率增加比较缓慢。 3.3 温度对提取率的影响 称取南瓜茎干粉10 g，在固液比1∶25，乙醇浓度为50%，提取时间为1 h，不同提取温度对南瓜茎总黄酮提取率的影响见图3。 由图3可以看出，南瓜茎中总黄酮的提取率随温度变化比较显著，并且随着温度的增加而增加。80℃黄酮得率达到最大，因为乙醇的沸点是82.8℃