酶联免疫吸附试验影响因素研究及控制方法.docVIP

酶联免疫吸附试验影响因素研究及控制方法文章编号：1005-619X（2007）08-0480-02 酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种非均相免疫分析技术，具有操作简便、特异性强、重复性好等优点，广泛用于各种抗原和抗体的检测，是目前临床实验室主流的免疫学检测方法。但由于影响ELISA的因素较多，用适当的方法控制影响因素是保证实验准确性的重要手段，本文详尽分析了试验的影响因素及控制方法，以期同行参考。 1 试剂因素 1.1ELISA是将酶的催化作用与抗原抗体免疫反应相结合的一种分析技术，低温试验材料影响抗原与抗体免疫反应的特异性，也降低酶本身的催化活性，从而影响实验结果，故从冷藏环境中取出的试剂及微孔反应板置37℃平衡30min后方可使用，余者应封存冰箱中储藏备用。 1.2鉴于目前生产ELISA试剂盒的厂家众多，所用固相载体的种类、酶的纯度、抗原抗体成分及生产工艺不同，其敏感性和特异性亦不同，要选购相对知名度高具有“三证”的试剂盒，使用前最好验证试剂质量，使PCX与NCX比值达到质量合格要求。 1.3勿混用不同厂家不同批号的试剂和过期失效的试剂，即使是同一厂家生产的洗涤液和显色剂也不要通用，以确保结果的准确性。 2 标本因素 2.1标本中非特异性物质形成的免疫复合物易于吸附在固相载体的表面，造成假阳性。用含有0.05%TweeN-20的洗