耳针对血管性痴呆大鼠记忆及海马凋亡相关蛋白表达影响.docVIP

耳针对血管性痴呆大鼠记忆及海马凋亡相关蛋白表达影响(贵阳医学院附属医院,贵州550004) [摘要]目的:探讨耳针对血管性痴呆大鼠(VD)学习记忆障碍的改善与bcl?2、bax凋亡相关蛋白表达的关系。? 方法:采用4?血管阻断制备VD大鼠模型,针刺脑、肾耳穴后,作免疫组化、行为学测试及图像分析。? 结果:耳针治疗后VD大鼠海马CA1区bcl?2、bax蛋白表达增加,特别是bcl?2明显增加,与学习记忆成绩呈正相关。? 结论:耳针改善VD大鼠学习记忆,可能是通过针刺调控细胞凋亡,达到对VD大鼠海马神经元的保护作用。? [主题词]耳针;痴呆,血管性/针灸疗法;记忆/针灸效应;海马/针灸效应EffectsofAuricular NeedlingonMemoryandExpressionofApoptosis? RelatedProteinsinHippocampusinRatsofVascular DementiaZhangXuechao,LüMingzhuang,Jian gNaichang,etalHospital AffiliatedtoGuiyangMedicalCollege,Guizhou550004)[Abstract]PurposeToapproach torelationofimprovementoflearningandmemorywithexpressionofa poptosis?relatedproteinsbcl2andbaxinthe ratofvasculardementia(VD).MethodsVDratmodelwasprepa redbyocclusionoffourblood?vesselsandafteracupunctureatauricu larpointsNaoandShen,immunohistochemicalanalysis, behavioralobservationandimagepatternanalysisweremade. ResultsAftertreatmentofauricularneedling,expressionso fbcl?2andbaxproteinsinCA1regionofhippocampusincreased,especially,bcl? 2hadobviousincrease,whichwaspositivelycorrelatedwithlearningandmemory.ConclusionAur icularneedlingimproveslearningandmemvv oryinratsofVDpossiblythroughcontrolofapoptosisofcellstoprot ectneuronsofhippocumpus.? [Keywords]AuricularAcupuncture;Dementia,Vascular/acupther;Memory/acupeff;Hippocampus/acupeff随着社会人口老龄化,血管性痴呆(VascularDementia,VD)的发病逐年增加。为发挥耳针安全、无副作用、易于推广的优势,探索VD非药物疗法的新途径,本实验选用改良的Pulsinelli4?血管阻断(4?vesselocclusion,4?VO)制备近似人类临床发病特点的、国际公认的VD大鼠模型[1],并进行耳针治疗。鉴于细胞凋亡与痴呆及缺血的发病机理有密切关系[2],本实验选用免疫组化、图像分析、Y?型迷宫等方法,研究大鼠治疗后学习记忆及海马CA1区凋亡相关蛋白bcl?2、bax表达的改变,旨在探讨VD发病及耳针治疗的可能机制,为临床治疗提供实验依据。 1材料与方法 1.1动物及分组Wistar大鼠,雄性,200～250g,随机分为VD模型组、耳针治疗组、假手术及正常对照组,每组10只。大鼠由中国人民解放军第三军医大学动物中心提供。? 1.2模型制备及耳针治疗用水合氯醛(0.5ml/100g体重)腹腔麻醉大鼠,背侧正中切口,用电凝针经第1颈椎横突翼小孔,闭塞双侧椎动脉。腹侧颈正中切口,分离双侧颈总动脉,24小时后,可逆性夹闭双侧颈总动脉3次,每次5分钟,间隔1小时。根据华兴邦提供的方法[3],定位大鼠脑、肾耳穴。模型制备成功后,即进行耳针治疗,每天1次,每次30分钟,共治疗15天。 1.3学习记忆测试用3等臂Y?型迷宫箱测试大鼠学习记忆[4]。大鼠学习记忆成绩分别以其测试达到连续10次中有9次正确反应时所需的电击次数表示。? 1.4免疫组织化学染色常规麻醉、灌注、固定、取材、冰冻切片,厚30μm。免疫组化染色按蔡文琴推荐的方法进行[5]。