基片的制备:点样:杂交:显色.PDF

基片的制备:点样:杂交:显色

第一部分:基片的制备 第二部分:点样 第三部分:杂交 第四部分:显色系统与信号检测 第一部分:基片的制备 基片是生物芯片的基础,是生化反应的载体。生物芯片以其基片的不同可以分为无机基 片和有机合成物基片。前者主要包括玻璃片、塑料、硅胶晶片、微型磁珠,其上的探针主要 以原位聚合的方法合成;后者主要有特定孔径硝酸纤维膜、尼龙膜和凝胶块等,其上的探针 主要是预先合成后通过特殊的微量点样装置或仪器滴加到基片上去 (20­22) 。在选择固相载体 时,应考虑其荧光背景的大小、化学稳定性、结构复杂性、介质对化学修饰作用的反应、介 质表面积及其承载能力以及非特异吸附的程度等因素。 因此制作生物芯片的载体材料必须以 下特征:良好的生物兼容性;足够的稳定性,能够抵抗一定热、酸、碱等条件;表面活性, 表面应具有各种活性基团,以便与各种生物分子连接;良好的光学性质。 基片在使用前一般需活化处理。活化试剂 EDC、NHS 等通过化学反应在载体表面键合 上活性基团如氨基、环氧化物、巯基、醛基、肼基,以便于与配基相结合,形成具有生物特 异性的亲和载体,用于固定生物活性分子,如蛋白质、核酸、多肽等。不同的载体就有不同 的活化方式,玻璃基片常采用氨基、醛基、巯基这三种修饰方式。 主要材料:玻璃片:普通无色玻璃,规格 75×25×

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