中心组合设计优化酶解蓝圆鲹制备降血压肽论文.docVIP

中心组合设计优化酶解蓝圆鲹 目 录 摘 要 I ABSTRACT II 目 录 IV 第一章 绪论 1 1.1 高血压及其危害 1 1.2 食品源降血压肽的研究与制备 1 1.3 降血压肽的作用机理 2 1.4 酶法制备降血压肽 3 1.5 研究目的、意义及主要内容 4 第二章 实验部分 5 2.1 实验材料 5 2.2 仪器设备 5 2.3 脱脂蓝圆鲹鱼粉的制备 5 2.4 蛋白质含量的测定 6 2.5 酶解蓝圆鲹鱼肉蛋白 8 2.5.1 酶解工艺 8 2.5.2 水解度的测定 9 2.6 酶解条件优化 10 第三章 实验结果与分析 11 3.1 蓝圆鲹鱼粉的蛋白质含量 11 3.2 响应面实验优化酶解工艺条件 11 3.2.1 响应面实验分析与回归方程的建立 11 3.2.2 响应曲面的分析 13 3.3 验证实验 16 第四章 结论与展望 17 4.1结论 17 4.1.1 蓝圆鲹的蛋白质含量 17 4.1.2 酶解蓝圆鲹鱼肉蛋白 17 4.1.3 中心组合优化设计 17 4.2 展望 17 参考文献 18 附录（一）英文文献原文 21 附录（二）英文翻译 36 致 谢 47 第一章 绪论 1.1 高血压及其危害 高血压病是最常见的心血管疾病，它不仅患病率高，而且是引起冠心病、心肌梗塞、脑卒中、心脏病及肾功能衰竭的最主要的发病因素。其根据起病和病情进展的缓急及病程的长短可分为两型，缓进型（chronic type）和急进型（accellerated type）高血压，前者又称良性高血压，绝大部分患者属此型，后者又称恶性高血压，仅占高血压病患者的1%～5%。这两种高血压都对人类健康构成了严重的威胁。 在世界范围内，每年有760万的过早死亡（约占全球总量的13.5％）和92万的伤残调整损失寿命年(DALYs)（约占全球总量的6.0％）是由高血压引起的，全球约54％的中风和47％的缺血性心脏病也是缘于高血压[1]。随着我国经济的飞速发展，人民生活水平的提高，人民平均寿命的延长，我国将步入老龄化社会，患病率将明显上升。在过去的几十年中，中国高血压的患病率和绝对数正在快速增长。例如，中国成年人中估计的高血压人数已经从1960年的3000万增加到1980年的5900万，1991年又增加到9400万，2002年我国高血压的患病率更是达到了27.2％，人口数已达1.3 亿[2]。这种升高的势头仍在持续，并且高血压大大增加了冠心病、心力衰竭、脑卒中的危险，形势十分严峻，直至发生临床迹象如心脏病发作、脑血管破裂等导致死亡，因此高血压被称为“无声杀手”，高血压的这种高发病率、高并发症、高致残率严重影响了人体健康，其己成为成为全球性的重大公共卫生问题。治疗和预防高血压对提高人类的健康水平，延长寿命有着重要的意义。因此，在日常生活中控制高血压的发展进程具有特殊的意义。 1.2 食品源降血压肽的研究 天然食品中的降血压肽通常是由蛋白质水解酶在温和条件下水解蛋白质而获得的一类多肽，食用安全性高，且它们共同的突出优点是对高血压患者可以起到降压作用，且对血压正常的人无降压作用，同时还具有免疫、促进减肥及消化吸收等生理功能[3]。因此，对其的研究发展非常迅速。Oshima[3]等于1979年首次报道了利用细菌胶原酶水解凝胶并从其水解物中分离出了 6种降血压肽。此后 ,研究者相继成功地从大豆、酪蛋白、玉米、酒糟等众多食物蛋白质中获得了ACE抑制肽。日本是研究ACE抑制肽最多的国家，主要从乳源蛋白质中提取，其次是鱼蛋白，其中已有一部分实现工业化生产。我国在这方面的研究尚属起步阶段。但是我国具有丰富廉价的动植物蛋白资源。如何合理利用好现有的资源加工制备高活性ACE 抑制肽是今后研究方向之一。这些研究的进展将促进具有良好的市场前景和社会效益的ACE抑制肽的开发应用。 目前，酶解蛋白制备降血压肽的研究从来源上主要集中在植物蛋白（包括大豆蛋白、玉米蛋白和其他一些植物蛋白资源），动物蛋白（包括陆地动物蛋白源、海洋蛋白源）。鱼类蛋白是一种优质动物蛋白，不仅蛋白质含量高，氨基酸模式更接近人体需要。酶水解法条件温和，氨基酸不被破坏，构型不发生变化。在各类多肽的生产中，酶解法是目前研究得最多的一种方法。自从发现蛋白质经酶解处理可以释放出具有各种活性多肽以后，酶解法处理蛋白质就引起了人们的广泛关注。它是目前生产生物活性肽主要采用的方法。如果能够通过酶法加工鱼类蛋白获得抑制ACE 的活性肽，对充分利用我国的蛋白质资源、促进人们生活质量的提高将会收到很好的经济效益和社会效益。 其中蓝圆鲹因为价格低廉，富含蛋白质，而具有较高的研究价值[4]。蓝圆鲹，鲈形目鲹科圆鲹属的一种。又称池鱼，巴浪鱼。暖水性中上层鱼类，分布于中国海南省到日本南部；在东海主要分布于中