液相色谱与串联质谱技术在临床上的应用.pdfVIP

·808· ·综述· 液相色谱与串联质谱技术在临床上的应用 李妍综述徐雏家 高鹏审校 【摘要】液相色谱串联质谱(LC-MS／MS)是一种高效能、高选择性、高灵敏度的分离分析方法。 LC-MS／MS结合了色谱和质谱二者的优点，使样本的分离、定性和定量成为连续的过程。该技术与 传统检测方法相比具有样品用量少、分析速度快、检测范围广等优点。LC-MS／MS已广泛应用于新 生儿遗传疾病筛查、激素水平检测、药物分析及微生物鉴定等各个方面。现就液相色谱串联质谱在临 床上的应用作一综述。 【关键词】色谱法，液相， 串联质谱法；临床实验室技术 中图分类号：R446．61文献标识码：A 文章编号：1673—4130(2008)09—0808-03 1906年Thomson研制出世界首台质谱仪。20世纪20年分解的物质。液相色谱(1iquid 代质谱逐渐成为一种分析手段，被化学家采用。20世纪40年高沸点，相对分子质量大、热稳定性差的物质，而且不仅可以利 代，化学家公认质谱能为有机化合物结构研究提供大量的有用 用被分离组分的极性差异，还可以利用组分尺寸大小差别、离 信息，被喻为“一个完整的化学实验室”。直到20世纪80年子交换能力差别等进行分离。一些缺乏特定分子特性如紫外 吸收、荧光素，或者特征性电化学表现的化合物不能用常规液 代，Bruins和Coney等发明了大气压离子化技术，该技术可在 常温和常压下实现离子化过程，推动了生物质谱和各种质谱联 相色谱方法确定，通过单极质谱系统就有可能确定化合物。由 用技术的迅速发展。1989年第一台商业化液相色谱串联质谱于单极质谱是根据质／荷比进行检测，所以较LC而言特异性 仪问世。尽管现在色谱与串连质谱技术已成为生物医学和蛋 更高。然而，由于在生物样品中存在很多分子量相同、但结构 白组学研究的重要技术，但距临床医学应用仍有一段距离。这 完全不同的化合物或者化合物在电喷雾离子化过程中可能呈 是因为色谱与串连质谱技术与自动化生化和免疫分析仪相比， 现倍数电荷关系的情况，在测定生物样本时，单极LC—MS仍然 操作技术条件要求高、出现的故障复杂等有关。但是质谱技术 需要进行相关化合物的色谱基线分离。液相色谱串联质谱仪 可提供快速、易解的多组分的分析方法，且具有灵敏度高、选择 (Lc-MS／MS)将需要分析的生物分子首先进入高压液相色谱 性强、准确性好等特点，其适用范围远远超过放射性免疫检测 仪进行洗脱、分离，制备成质谱的样品，然后通过离子化技术及 和化学检测范围，质谱技术可以检测到极微量的物质，是其他 接口技术对已制备的样品进行质谱定量分析。在单极LC—MS 基础上引入第二级质谱形成串联质谱后，通过母离子扫描、子 方法无可比拟的，所以近年来液相色谱与串联质谱(MS／MS) 的联合应用得到了极大的重视和发展，并且随着该技术的不断 离子扫描或中性丢失扫描等各种扫描方式，可以获得丰富的化 完善和改进，将会在临床医学领域中发挥更大的作用。 合物结构信息，通过多反应监测可以做到在复杂样本体系中进 行目标化合物快速定量。即从复杂的一级质谱中选择一个或 质谱原理 几个特定的母离子进行二次碎裂，对产生的子离子碎片进行检 测得到质谱图。串联质谱与单级质谱相比，二级质谱图比一级 质谱(massspectrometry，MS)是样品分子或原子在外部 能量作用下，经电离或电离后进一步分解生成的各种离子在质 质谱图要简单得多，不仅改善了信号的信噪比，提高了特异性 量分析器(通常是电场或磁场)作用下，按照带电粒子的质量对 和灵敏度，还可极大地减少待测样品量，并最大程度地排除干 所带电荷之比值的不同而分离排列的图谱，并在此基础上进行 扰。液相色谱大大拓宽了分离范围．生物大分子也能分