苏云金芽胞杆菌晶体蛋白Cry6A及秀丽小杆线虫的相互作用研究.pdf

分类号 Q窆三窆：窆 密级 学校代码 !Q5垒2 学号 201202141171 苏云金芽胞杆菌晶体蛋白Cry6A与 秀丽小杆线虫的相互作用研究 ontheinteractionofBacillus Study th nietCorOAdanan uringiensiscrystalproteinry6A Caenorhabditis elegans 指导教师姓名、职称 金主全割塾撞 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二。一五年五月 万方数据 摘 要 苏云金芽胞杆菌(Bacillus 是目前世界上应用最为广泛的微生物杀虫剂。Cry6A晶体蛋白毒素是Bt 生成的一种结构独特的杀线虫晶体蛋白，对线虫有多种毒杀活性。当秀丽 小杆线虫受到Cry6A晶体蛋白毒素攻击时，线虫会采取多种防御策略来 保护自身。我们在前期中采用蛋白质组技术研究发现，Cry6A晶体蛋白毒 素能引起线虫多种蛋白表达水平发生明显改变。本论文针对这些差异表达 蛋白在线虫对Cry6A晶体蛋白毒素防御反应中的功能开展了研究。 研究结果表明，Cry6A晶体蛋白毒素作用线虫能显著提升线虫体内与 能量代谢相关酶的表达水平，如精氨酸激酶和丙酮酸脱氢酶活性分别提高 1．53倍、1．92倍；由于能量代谢相关酶表达水平的上升导致线虫体内ATP 其水平提高6．67倍。当线虫处于毒素胁迫的环境中，线虫通过提高能量 代谢水平来满足其启动免疫防御反应的能量需求，从而抵御Cry6A晶体 蛋白毒素的攻击。 Cry6A晶体蛋白毒素能显著提高线虫与运动相关蛋白Dim．1表达水 平。通过Cry6A晶体蛋白毒素作用秀丽小杆线虫野生型N2和运动相关蛋 白基因dim—J突变株DM2后，对其运动轨迹的波长和振幅分析。其中突 变体DM2的波长和振幅随着Cry6A晶体蛋白毒素浓度的下降程度比N2 更加明显，且有显著性差异，表明突变体DM2对Cry6A晶体蛋白毒素更 为敏感。DM2突变株不能表达DIM．1蛋白，导致其运动能力更容易受到 毒素的影响；线虫在遭受毒素攻击时可通过提高DIM-1蛋白表达水平来 保护自身的运动机能，表明Dim．1蛋白在保护线虫运动能力免受毒素负面 影响方面发挥了重要作用。 Cry6A晶体蛋白毒素作用线虫显著影响与寿命相关蛋白的表达水平。 对秀丽小杆线虫的寿命进行研究，结果表明Cry6A晶体蛋白毒素引起线 虫寿命的缩短。与野生型N2相比，Cry6A晶体蛋白毒素对线虫突变株 万方数据 防御反应中发挥了重要作用。 本论文研究结果表明，当秀丽小杆线虫在Cry6A晶体蛋白毒素的作 用下，会通过提高能量代谢水平来促进免疫防御反应、修复运动能力、调 节寿命长短等多种防御机制来保护自身。这些研究结果为我们从生理生化 及免疫反应等层面深入探讨线虫对晶体蛋白毒素的防御机制提供了重要 启示，并有助于我们深入了解线虫这一模式生物在自然环境下的生存机 制，深入理解线虫生态学，都具有重要意义。 关键词：苏云金芽胞杆菌，秀丽小杆线虫，Cry6A晶体蛋白，防御反 应，能量代谢，线虫寿命，运动能力 II 万方数据 ABSTRACT crystal Bacillus isthe Parasporalproteinproducedby thuringiensis(B0 most usedmicrobial isa