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第五章 医药生物技术; 人 类 基 因 体 计 划 Human Genome Project (HGP);100兆细胞、30亿硷基对 97% 功能不明(?) 1.1%表现序列(exons)外显子 24% 内含子(introns) 75%基因序列没有实际作用或功能未知 人与人差异 0.1%（？ 0.5%） 与黑猩猩相同性 98.8% 基因总数 2.0-2.5万;人类基因数一;人类基因数二;人类基因数三;人类基因图谱的绘制;人类染色体图谱一;人类染色体图谱二;5-2 基因治疗;病毒载体-危险性、效率高 反转录病毒: RNA → DNA 插入宿主染色体(随机)，产生变异或造成不具功能 腺病毒: 同源基因重组、问题-产生发炎反应 腺病毒关联载体：限制-转殖基因有限 疱皮疹毒：缺点-病毒本身太复杂 非病毒载体-安全性高、效率差 物理方式: 基因枪导入法、电穿孔法、直接将DNA打入肌肉(DNA疫苗) 化学方式:微脂粒导入法(表现皆短暂性)、 磷酸钙沉淀法(利用细胞的胞饮作用) ;基因治疗标的???胞的种类;基因治疗的应用范围;基因治疗所遭遇的困难;癌症形成的原因相当的复杂 细胞核基因的异常是导致癌症发生的基本原因 在人体细胞中，所有谓的致癌基因(oncogen)和抑癌基因(tumor suppressor gene)。致癌基因或是抑癌基因的缺损或是变异容易导致癌症的发生 (影片: cancer.mpg) 癌症发生的相关危险因子 遗传 家族性大肠息肉症(Familial polyposis syndrome) （大肠癌） 母亲或是姊妹有乳癌患者，则罹患乳癌的比率也会大为提高 放射线 核爆生还者罹患血癌的比例大为提高 放射线碘容易引起甲状腺癌 ;B型、C型肝炎病毒带原者较常人易引起肝癌 Epstein-Barr病毒易引起Burkitt氏淋巴瘤(Burkitt＇s lymphoma) 人类乳突病毒(Human papilloma virus)易引起子宫颈癌 HTLV-1人类T 细胞白血球第一型病毒感染者有一小部份会发生T细胞淋巴瘤 (细菌感染)胃中特殊的幽门杆菌(Helicobacter pylori)和淋巴瘤 (MALToma) 化学或药物刺激 黄麴毒素易引起肝癌 石绵易引起肺癌和间皮瘤(mesothelioma) 芳香族化合物和膀胱癌的关系也曾被报告过;长期动情激素(estrogen)的刺激是子宫内膜癌和乳癌的危险因子之一 所以初经早、停经晚、和未生育小孩的妇女，其动情激素的刺激较久，发生子宫内膜癌和乳癌的机会较高 饮食因素 多食用青菜水果纤维素等已被证实有效降低癌症的发生率 饮食中过多脂肪容易肥胖，而肥胖容易导致脂溶性致癌毒性物质囤积在身体中有较高的致癌机会 过多的腌制食物，其致癌物质，如亚硝胺类等，也会增加，因而提高致癌的机会 ;不良的行为，如抽烟、喝酒等，会增加肺癌和食道癌的发生机会 多重性伴侣及危险性性行为等，会增加感染人类乳突病毒的机会，因而增加子宫颈癌的发生率 ;96年国内十大死因;男性前十大恶性肿瘤种类 肝癌、肺癌、结肠直肠癌、口腔癌、胃癌、食道癌、摄护腺癌、胰脏癌、非何杰金淋巴癌、鼻咽癌 女性前十大恶性肿瘤种类 肺癌、肝癌、结肠直肠癌、女性乳癌、胃癌、子宫颈癌、胰脏癌、非何杰金淋巴癌、胆囊癌、卵巢癌 ;基础免疫观念一;非专一性免疫反应（先天免疫） 反应介质 补体 发炎介质 杀菌物质 反应细胞 颗粒球（嗜中、酸、硷性球） 巨噬细胞 自然杀手细胞 肥大细胞;免疫细胞起源：淋巴系统与造血系统一;免疫细胞起源：淋巴系统与造血系统二;严重急性呼吸道症候群(SARS);反转录聚合酶连锁反应（RT-PCR） 将RNA反转录成DNA，再继续将DNA数量放大 分离病毒→RT-PCR →定序比对 即时PCR检测技术(Real-Time PCR) 传统PCR需要时间较久、解析度差、低正确性、低敏感度、无自动化、结果无法量化 利用萤光讯号，即时监测反应 免疫萤光抗体法(indirect fluorescent antibody test, IFA) 测病人血清中有无病毒抗体; 需要时间较久 琼胶解析度差（需差10倍） 低正确性 低敏感度 无自动化 只鉴别大小 结果无法量化 仅呈现PCR最后的结果 Real-Time PCR可改善上述的缺点;Real-time PCR;微生物或其表面抗原制作成对抗此病原的物质 具专一性 可使免疫系统产生反应与记忆 为主动免疫 人类免疫缺乏病毒（HIV）会引以爱滋病 到目前无法制造出有效的疫苗 WHY? 突变速率太快 多种躲避人体免疫系统侦测的策略;单株抗体;细胞融合技术;单株抗体的制作流程;干细胞;干细胞的应用一;干细胞的应用二;胚胎 = 人 脐