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实验六 微生物分离与培养 12年版
实验七 微生物的分离与纯化; 实验原理;实验材料;无菌操作环节;;（二）样品稀释液制备流程;样品稀释：含菌样液的制备;稀释分离关键操作;样品稀释流程图;稀释平板分离培养的菌落; 固体培养基溶化，冷却至50℃;平板划线分离法;;平板划线分离生长的菌落;在正式作平板划线前，应以空平皿作模拟划线，切实掌握平板划线的要领。
平板划线接种环必须圆滑，动作轻巧。
挑菌不宜过多,每次划线前必须灼烧接种环。
切勿划破培养基。
四个区必须分明，第一区不能与第四区相接触。
必须在酒精灯火焰旁，以无菌操作划线。
; 实验报告 ;采用倾注法对土壤样品进行微生物计数; (3)当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。
菌落总数的计数方法：
1)若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值再乘以相应稀释倍数，作为每克（毫升）中菌落总数结果。 ;2) 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内，按式（1）计算：
………………………（1）
式中：
——样品中菌落数；
——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；
——第一个适宜稀释度平板的个数；
——第二个适宜稀释度平板的个数；
——稀释因子（第一稀释度）。
示例：
稀释度1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）菌落数
232，244 33，35;上述数据经“四舍五入”后，表示为25 000或2.5×104。;3)若所有稀释度的平板上菌落数均大于300，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为“多不可计”，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
4)若所有稀释度的平板菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
5)若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
6)若所有稀释度的平板菌落数均不在30~ 300之间，其中一部分小于30或大于300时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算。;菌落总数的报告：
1)菌落数在100以内时，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字报告、
2)大于或等于100时，第三位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前两位数字，后面用0代替位数；也可用10 的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字报告。
3)若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延
4)若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
5)称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。
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