.1-4 维生素的测定.pptVIP

1、原理：用酸处理过的活性碳把还原型的抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸，在继续氧化为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与2，4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎，其成色的强度与二酮古乐糖酸浓度呈正比，可以比色定量。 第三节? 水溶性维生素的测定 二、维生素C的测定 （二）2，4-二硝基苯肼法 * 2、步骤 ⑴ 样品处理与分析 称一定样 → 加等量2%草酸 → 于高速捣碎机捣碎 → 取匀浆20g → 用1%草酸定容100ml → 过滤 → 取滤液10ml → 加1%草酸10ml → 加少量活性炭 → 摇1分钟 → 静置过滤 → 各取滤液2ml于样品管和样品空白管 → 各管加入1滴硫脲溶液 → 于样品管中加入2，4-二硝基苯肼0.5ml → 分别于两个管加盖 → 第三节? 水溶性维生素的测定 二、维生素C的测定 （二）2，4-二硝基苯肼法 * 于37℃保温箱3小时 → 取出后样品管放入冰水中 → 样品空白管取出后冷至室温 → 在样品空白管加入2，4-二硝基苯肼 → 0.5ml → 样品管和空白管都于冰浴中 → 滴加85%H2SO42ml于各管中 → 边滴边摇 → 防止温度升高炭化后呈黑色 → 冰浴中30分钟后取出 → 室温下放置30分钟后，在540nm测消光值，从标准曲线上查出相应的含量 第三节? 水溶性维生素的测定 二、维生素C的测定 （二）2，4-二硝基苯肼法 2、步骤 ⑴ 样品处理与分析 * ⑵ 标准曲线的绘制 取5个50ml容量瓶编号? 1???? 2???? 3???? 4???? 5 加VC标准液 10??? 20??? 30??? 40??? 50ml 取5个比色管取相应??? ? 2???? 2???? 2???? 2???? 2 加硫脲溶液（滴）?????? 1???? 1???? 1???? 1???? 1 2，4-二硝基苯肼（ml） 0.5?? 0.5??? 0.5?? 0.5??? 0.5????? 于37℃保温箱3～4小时，取出于冰浴中，然后滴加85%硫酸2.5ml→取出放30分钟→在540nm下测各消光值绘标准曲线，同时做空白。 计算：每百克食品中抗坏血酸的毫克数=C/W *100 第三节? 水溶性维生素的测定 二、维生素C的测定 （二）2，4-二硝基苯肼法 2、步骤 * 三、维生素B1（硫胺素），B2(核黄素)的荧光测定法 * 荧光分析法基本原理 当紫外线照射到某些物质的时候，这些物质会发射出各种颜色和不同强度的可见光，而当紫外光停止照射的时候，这种光线很快的消失，这种光线被称为荧光。荧光光谱是一种发射光谱，根据物质荧光波长可确定物质分子具有的某种结构，从荧光强度可测定物质的含量。这就是荧光分析法。 * 分子结构和荧光的关系 共轭∏体系 钢性平面结构 ：我们用芴和联苯作一个比较 芴 =1.0 联苯 =0.2 * 让我们看一看维生素B1的分子结构: 并不是一个好的荧光体 * 于是我们将它氧化，成为蓝色的荧光物质硫色素： 之后，我们采用荧光光度计测定其浓度 * 再看维生素B2：一个平面钢性分子！ 它本身就是一个好的荧光物质，440～500nm 波长下能发射荧光，可直接被测定 * * 参考书目： 孙中武 编著,《植物化学》.哈尔滨:东北林业大学出版社2001 倪坤仪 主编,《仪器分析》.南京:东南大学出版社,2003 * The end谢谢! * 胡萝卜素对热及酸、碱比较稳定，但紫外线和空气中的氧可促进其氧化破坏。因系脂镕性维生素，故可用有机溶剂从食物中提取。 胡萝卜素本身是一种色素，在450 nm 波长处有最大吸收，故只要能完全分离，便可定性和定量。但在植物体内，胡萝卜素经常与叶绿素、叶黄素等共存，在提取 β一胡萝卜素时，这些色素也能被有机溶剂提取，因此在测定前，必须将胡萝卜素与其它色素分开。常用的方法有纸层析、柱层析和薄层层析法。 * 三、维生素D的测定 维生素D是指含有抗伺楼病活性的一类物质，具有维生素D活性的化合物约有l 0种，其中最重要的是维生素D2、维生素D 3及其维生素D原。维生素D 2无天然存在，维生素D2只存在于某些动物性食物中。但它们都可由维生