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④ 可以得到次级苷或低聚糖 酶水解特点： ② 条件温和，苷元结构不变 ③获知苷键的构型 ① 反应专属性强，选择性高 三、酶催化水解反应 * 芥子苷酶→芥子苷（S-苷） 常见的酶及其应用： 纤维素酶→β－葡萄糖苷 麦芽糖酶→α-葡萄糖苷键 转化糖酶→水解β-果糖苷键 杏仁苷酶→β-葡萄糖苷 专属性较低 六碳醛糖苷 * 四、过碘酸裂解反应（Smith裂解法） 1. 反应过程： 可得到原苷元（除酶解外，其它方法可能得到的是次级苷元） 试剂：过碘酸钠(NaIO4)、 四氢硼钠(NaBH4)、稀酸 * 2．Smith降解特点： 　① 水解条件温和。 ② 适应于苷元不稳定的苷 以及C-苷的水解。 ③此方法不适用于苷元上也 有1，2-二元醇结构的苷类。 * 第五节 糖和苷的提取分离 自植物中提取糖和苷类，一般都是 利用水或醇进行抽提。 ①新鲜药材，速干，冷冻保存。 　②提取时宜用沸水、醇 　 ③先用碳酸钙拌和后再用沸水提取。 提取原生苷：——抑制酶活性 （一）提取 * 提取次生苷： 30～40℃水浸24h以上，再用醇提取 加防腐剂 不能直接用醇提取。 * （二）分离 1．活性炭柱色谱 2．纤维素色谱 3．离子交换柱色谱 4．凝胶柱色谱 5．季铵氢氧化物沉淀法 6．分级沉淀或分级溶解法 7．蛋白质除去法 * 第六节 糖的鉴定和糖链结构的测定 （一）糖的鉴定 1．纸层析 展开系统：常用水饱和的有机溶剂展开。 如：正丁醇：醋酸：水（4：1：5上层）BAW 水饱和苯酚等溶剂系统。 * 可用（硼酸液+无机盐）+硅胶→制板 吸附剂：硅胶 2．薄层层析 * 3．气相层析 将糖制备成三甲基硅醚（增加其挥发性） 填充材料——化学修饰的硅胶 优点：不必制备成衍生物。 4．液相色谱 * 主要解决的问题——单糖的组成、糖之间的连接位置和顺序、苷键构型 1．单糖的组成 2．单糖之间连接位置的决定 3．糖链连接顺序的决定 4．苷键构型的决定 5．13C-NMR在糖链结构测定中的应用 （二）糖链结构的测定 * 低聚糖、多糖的结构分析，首先要了解由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。 一般是将苷键全水解，用PC检出单糖的种类，经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。 1．单糖的组成 也可用GLC或HPLC对单糖定性定量。 * ① 将糖链全甲基化→水解→甲基化单糖的 定性和定量（气相层析） ② 13C-NMR测定：主要归属各碳信号，以确定 产生苷化位移的碳。 2．单糖之间连接位置的决定 * ① 缓和水解法：将糖链水解成较小的片段，然后分析这些低聚糖的连接顺序。 ② 质谱分析 3．糖链连接顺序的决定 （1）酶催化水解方法 （2） 1H-NMR判断糖苷键的相对构型 4．苷键构型的决定 * （三）1H-NMR在糖苷结构测试中的应用 　在糖的1H-NMR中： 1．化学位移： 端基质子——δ4.3～6.0 ppm左右 其它质子——δ3.2~4.2 ppm 可通过C1-H与C2-H的偶合常数，来判断苷键的构型（α、β）。 * 如：D-葡萄糖 2 ．偶合常数： O O R H H O H O O R H H O H 180 60 。 。 -D-glucose -D-glucose C 1 -H C 2 -H 近180 （双面角） J=6~8 Hz 。 C 1 -H C 2 -H 近60（双面角） J=2~4 Hz 。 α β * 用1H-NMR可判断一些糖的相对构型，但还有一些糖由于其结构上的原因，而无法利用1H-NMR来判断相对构型。如： * 再如： * (四) 13C-NMR在糖链结构测定中的应用 1．化学位移： 端基碳——δ95~105 ppm 一般在13C-NMR谱中： * 2 ．偶合常数： 吡喃糖中端基碳氢的偶合常数（1JC1-H1） α-D或β-L型苷键 J=170~175 Hz β-D或α-L型苷键 J=160~165 Hz * 糖苷化后，端基碳和苷元α-C化学位移值均向低场移动，而邻碳稍向高场移动（偶而也有向低场移