超高效液相色谱在中药探究中应用.docVIP

超高效液相色谱在中药探究中应用摘 要：目的：综述近年超高效液相色谱（UPLC）在中药研究中的应用。方法：查阅、分析、归纳有关文献。结果：超高效液相色谱是近年来发展的以超高速度、超高分离度、超高灵敏度为特点的新型液相色谱技术。结论：超高效液相色谱为中药研究提供了新手段和新思路，具有广阔的前景。 关键词：超高效液相色谱；UPLC；液相色谱技术；中药；应用 中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1007-2349（2012）06-0073-03 超高效液相色谱（ultra performance liquid chromatography，UPLC）系指一种采用小颗粒填料色谱柱（粒径小于2μm）和超高压系统（压力大于105kPa）的新型液相色谱技术，能显著改善色谱峰的分离度和检测灵敏度，同时大大缩短分析周期，因此特别适用于微量复杂混合物的分离和高通量研究。Waters推出的ACQUITY UPLC TM超高效液相色谱系统在2003年3月8日~12日举办的匹斯堡展会上一经露面便立即引起了轰动，这项被媒体称为令人“比预想的还要出色”的产品最终获得了2004年度的新产品金奖。2004年3月，Waters公司率先推出了第一台商品化的超高效液相色谱系统（ACQUITY，UPLC TM）。自问世以来，超高效液相色谱发展很快，现已成功应用于农药残留物检测、水质和环境监测、化妆品质量控制、药物及制剂的分析检测和质量控制、中药复杂组分分析及代谢组学等领域［1~2］。现对超高效液相色谱在中药研究中的应用进行综述。 1 在中药提取工艺方面的应用 李耿等［3］使用超高效液相色谱（UPLC），采用析因试验设计，考察了丹参饮片在不同加水倍数、煎煮时间、煎煮次数下的煎出液中丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛等多种成分的含量变化规律。实验结果表明随着煎煮时间的延长，丹参中的主要水溶性有效成分丹酚B的含量会而逐步降低；而同时，丹参素和原儿茶醛的含量则持续增加。该研究得出如下结论：丹参酮类成分水煎煮很难溶出，丹参中的丹参素和原儿茶醛主要是来源于丹参酚酸类成分在较高温度下的逐步降解，测定或提取丹参中丹酚B等水溶性成分不宜采用长时间、高温煎煮的方式，丹参临床应用时应注意避免久煎。为今后更好利用丹参这一传统中药提供了很好的科学依据。曹悦等［4］使用UPLC，对中药龙胆的提取工艺进行了研究，该研究采用L9（34）正交表安排实验，Shimadzu C18（30×75 mm，17 μm）色谱柱，流动相为乙腈-04%磷酸（V∶V=55∶945），流速080 mL/min，检测波长235，270 nm，柱温为40 ℃。通过分析正交实验设计法的结果，在使用甲醇作为溶剂、提取时间为30 min时，超声提取和回流提取两种方法所测定的两个指标性成分的含量基本一致，但考虑到回流的操作相对复杂，而且一旦超出规定的回流时间，两类成分含量损失较大，原因是两类成分均为裂环烯醚萜苷类化合物，受热易分解，因此选择了耐用性较好的超声提取方法，并且在操作中严格控制温度。 2 在中药含量测定方面的应用 雷萍等［5］采用UPLC检测法，分离测定了多种虫草产品中腺苷和虫草素的含量。在最优化条件下，以ACQUITY UPLC C18为色谱柱，流动相为乙腈和水，等度洗脱，各组分在4 min内可基本实现基线分离。各组分浓度与峰面积在1~175μg/mL范围内呈良好线性，检测下限（S/N=3）分别为010 μg /mL和012 μg/mL。殷书梅等［6］采用超高压高效液相检测法，测定复方南星止痛膏中马兜铃酸A的含量，在Waters UPLC的高灵敏度色谱条件下，信噪比为3∶1时马兜铃酸A的最低检出限01 μg；3批制剂成品及中间体中均未检出马兜铃酸A；3批细辛药材中检出微量马兜铃酸A，平均含量为196μg/g，推算至每克制剂中含马兜铃酸A约为005μg，远低于口服制剂药品中马兜铃酸A含量不得高05μg/g的标准。唐军等［7］采用超高压高效液相检测法测定血栓通注射液中5种皂苷成分的含量，三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd在95 min内即达到良好分离，最低定量限和最低检测限可分别达05 ng和02 ng，平均回收率均大于950%。此外，超高效液相色谱在中药含量测定方面的研究还有诸多的报道［8~19］。 3 在中药代谢方面的应用 薛璟等［20］采用大鼠在体肠灌流实验，利用UPLC法测定雷公藤甲素的量，分别研究吸收部位和药物浓度对雷公藤甲素吸收的影响。实验结果表明4、83、20 pmol/L雷公藤甲素灌流液在各肠段的有效渗透系数和10 cm肠段吸收百分比（10 cm% ABS）依次为：十二指肠结肠空肠回肠，各肠段之间无显著性差异