断体地龙提取液促进小鼠创伤愈合作用研究-世界科学技术-中医药.pdfVIP

世界科学技术—中医药现代化★中药研究 断体地龙提取液促进小鼠创伤 愈合作用研究＊ 汪文琪，胡海聪，张志千，汤化琪，张硕峰，孙毅坤＊＊ （北京中医药大学中药学院 北京 100102） 摘  要：目的：在前期实验研究和“断体地龙假说”的基础上，探究断体地龙中活性成分促进创伤愈合 的机制。方法：采用小鼠皮肤切除性创伤模型，制备地龙提取液，通过苏木精- 伊红（HE ）染色和免疫组化 测定伤后创面愈合率及创面组织中血管内皮生长因子（VEGF ）、碱性成纤维生长因子（bFGF ）、转化生长因 子（TGF-β 1）的表达。结果：1. 断体地龙提取液给药组与空白对照组相比创面愈合率更大，且HE 染色后 发现其能明显改善创面组织的愈合。2. 地龙药物组VEGF 、TGF-β 1 2 种因子的表达与生理盐水组差别不 P 大，无统计学意义（ 0.05 ）。3. 地龙药物组bFGF 与生理盐水组相比，药物组bFGF 的表达提前到达峰值， 且持续时间较长；地龙药物组bFGF 的表达第1 天到达峰值，与对照组同一时间点阳性表达得分相比，具 P 有显著性差异（ 0.05 ）。结论：地龙提取液外涂对小鼠皮肤切除性创伤的愈合有促进作用，其机制可能与 VEGF 、TGF-β 1 的表达无关，而与炎症期和增殖期创伤部位bFGF 的表达增高有关系。 关键词：断体地龙 创伤愈合 免疫组化 机制探究 doi ：10.11842/wst.2015.07.021　　中图分类号：R285.5　　文献标识码：A 地龙具有很强的自身修复和再生能力，在民间 1  材料与方法 多作为传统验方治疗各种皮肤创伤，而目前国内外 . 主要材料、试剂和仪器 1 1 对地龙促进创伤愈合的研究却相对较少。前期研 赤子爱胜蚓（Eisenia foetida ）购自北京得益蚯 究表明，地龙断体第 3 天产生的创伤修复物质较多， 对细胞增殖的促进作用较强 [1,2] ，因此选取地龙断 蚓养殖场；健康清洁级雄性 ICR 小鼠，体质量 24- 30 g ，购自北京维通利华实验动物技术有限公司， 体第 3 天的提取液盐析后的组分进行本次实验，从 许 可 证 号：SCXK （京）2012-0001 。 匀 浆 机（IKA 而研究其对小鼠创伤模型的愈合作用。通过苏木 T10 basic ，艾 卡 仪 器 设 备 有 限 公 司）；冷 冻 离 心 机 精 - 伊 红（Hematoxylin Eosin ，HE ）染 色、免 疫 组 （TGL20M ，湘智离心机厂）。 化法和图像分析技术测定伤后创面愈合率及创面 免疫组化试剂一抗：VEGF （0.1 mL ×1.5，santa 中 组 织 中 血 管 内 皮 生 长 因 子（Vascular Endothelium 山分装，北京中山生物公司，批号），bFGF Growth Factor ，VEGF ）、碱性成纤维生长因子（basic （0.1 mL ×1.5，武 汉 博 士 德 公 司，批 号）， Fibroblast