乳腺癌中ER、PR及HER2的表达及其意义.doc

　　乳腺癌中ER、PR及HER2的表达及其意义 【摘要】目的 探讨HER2、ER、PR蛋白在北流地区乳腺癌患者中的表达情况，及HER2与ER、PR表达之间的相关性。方法 北流地区乳腺癌手术标本均经10%中性福尔马林固定，采用SP两步法进行免疫组合染色。结果 HER2蛋白与ER表达呈负相关，与PR表达也呈负相关。 【关键词】乳腺癌 ER PR HER2 乳腺癌是危害女性健康的恶性肿瘤之首，发病率呈逐渐上升的趋势。乳腺癌是全身性疾病，确切的病因仍未完全清楚。肿瘤的浸润与转移是一个多基因调控，多步骤、多阶段演进的过程，其中肿瘤细胞异常增生是肿瘤浸润于转移的基础，粘附性改变和运动能力增强以及细胞外接触抑制丧失是侵袭转移的条件。在乳腺癌相关蛋白中与其预后和治疗相关的主要为ER、PR和HER2，了解这三种蛋白的表达情况是乳腺癌治疗的关键。 1 材料和方法 1.1研究材料 收集2006年1月-2009年12月期间北流市人民医院病理诊断乳腺癌手术标本84例，发病年龄最小的37岁，最大的71岁，平均年龄51岁，中位年龄53岁。所有标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，所有标本均经重新制片及重新阅片以进一步明确诊断。 1.2研究方法 所有免疫组织化学染色试剂均购自福建迈新公司，即用型。采用SP两步法进行免疫组织化学染色，浓缩型DAB显色试剂盒，操作步骤按照说明书进行。 1.3检测方法 所有标本均经过10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，切片厚度为4μm，采用常规免疫组化染色SP法进行染色。具体方法如下：所有载玻片均经APES处理过的胶片，4μm连续切片，脱蜡至水化；3%双氧水室温孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活化，蒸馏水浸泡2分钟；微波高火修复15分钟；滴加一抗，4℃冰箱过夜，PBS冲洗5分钟×3；滴加A试剂，室温孵育30分钟，PBS冲洗3分钟×3；滴加B液，室温孵育20分钟，PBS冲洗3分钟×3；DAB溶液显色，自来水终止显色；苏木素复染细胞核、脱水、透明、封片。用已知的阳性片作为阳性对照，以0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。 1.4结果判断 癌细胞无着色为（-）、浅黄色或阳性细胞数≤25%为（+）、棕黄色或阳性细胞数在25%-50%为（2+）、棕褐色或阳性细胞数＞50%为（3+）；每张切片随机选择10个高倍视野，每个视野观察100个肿瘤细胞，计算平均阳性细胞比例为该肿瘤的阳性细胞百分比。其中HER2的判读参考2007年CAP/ASCO的标准，即任何比例的浸润性癌细胞有微弱的、不完整的包膜染色为（1+）；≥10%的浸润性癌细胞呈现不均一或弱但有明显环绕分布的膜着色或≤30%的浸润性癌细胞呈现强的、完整的包膜着色为（2+）；＞30%的浸润性癌细胞呈现均一的、强的包膜着色为（3+）。ER、PR的着色部位为癌细胞的细胞核。 2 结果 HER2与ER、PR在乳腺癌中的表达情况见下表 如上表所示，本文中84例乳腺癌患者中，HER2与ER、PR的表达均呈负相关，其表达均具有显著的统计学意义（P＜0.01）。 3 讨论 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势。据世界卫生组织国际癌症中心最新统计数据显示，全世界每年约有120万乳腺癌患者。乳腺是性激素依赖器官，其生长、发育和细胞的增值均受雌激素和孕激素的影响[1]。HER2（human epithelial growth fator receptor-2，HER2）在包括乳腺癌在内的多种上皮源性肿瘤中过表达[2]，与肿瘤的发生、发展、转移及放化疗敏感性下降关系密切，是极具发展前途的基因治疗靶位[1]。 HER2是生长因子受体家族成员之一，位于染色体17q21，编码分子量为185KD跨膜蛋白，由胞内酪氨酸激酶结构域、跨膜区和胞外结构域三部分组成，是具有蛋白酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，属于表皮因子受体家族成员[3]。到目前为止，尚未发现能与HER2直接结合的配体，与其他受体结合成异二聚体后能发挥信号转导功能，与不含HER2的二聚体相比信号更强。HER2受体细胞内区有PTK活性，自身也具有若干酪氨酸残基磷酸化位点。HER2蛋白可以促进DNA合成增加、细胞分裂、蛋白水解酶分泌增多，癌细胞生长加快，运动能力增加，肿瘤的侵袭与转移增强，恶性程度增加[4]。Hussein等[5]研究发现原癌基因HER2在乳腺癌中表达为10-34%，其表达与预后不良有关。本研究中HER2的表达率为20.24%（2+或以上被判定为阳性），与相关报道较一致，但其中2+的患者还需要通过FISH检测来确定HER2基因的扩增情况。且本研究组中HER2蛋白的表达情况与ER、PR的表达均呈负相关，表明该基因的激活在ER、PR硬性肿瘤中更常见。