从细胞信号转导探讨中医方证的规律性.doc

　　从细胞信号转导探讨中医方证的规律性 【关键词】 信号转导;方证;规律 中医方证的 现代 化研究多从代谢组学、蛋白组学、基因组学、化学、系统生物学等多种学科方向进行研究，尽管取得了很多喜人的成绩，但由于方证规律的复杂性和多样性，目前的方证研究仍然没有形成一个统一规范的系统，仍然处于百家争鸣、缺乏共识的阶段，方证间的规律性探索还有待于根据中医方证间的理论特点，选择合理的角度和途径。“方从法出，法随证立”的方剂制定原则，指出方证是建立在证候的基础上，根据不同的证候制定不同的治法，而选择相应的方剂。概括起来讲，方证是应用某一方剂的、反映患者综合而特定的病理状态的临床指征[1]。由此可见，方证规律性的研究亦应该以证候规律研究为基础展开。笔者认为，方证规律性的研究应立足大样本揭示证候规律性，然后以方来检验其规律性。 　 　1证候本质体现细胞信号转导 　　细胞信号转导指胞间通讯的激素等以及外界环境因子作用于细胞表面(或胞内受体) 后，跨膜形成胞内第二信使和其后的信息分子级联传递、诱导基因表达与引起生理反应的过程，生命现象的发生实际上都是机体内外信号传递的结果[2]。证候是指机体在疾病 发展 过程中的某一阶段的病理概括，包括病位、病因、病性、以及邪正关系，反映疾病发展过程中某一阶段的病理变化的本质，具有整体性、定型性、定系性、制约性、时相性的特点，是在致病因素作用下, 机体内外环境各系统之间相互关系发生紊乱所产生的病理要素的综合性诊断概念[3]。作为概括生命活动异常现象的证候，我们可以理解为，在某些原因的作用下，发病部位细胞间信号转导程度和方向发生改变，导致性质迥异的生命现象即疾病的发生。而证候的本质就是对这种信号转导程度和方向发生改变后所产生的异常表现的高度概括和 总结 。 　 　2细胞信号转导程度与水平异常变化奠定不同证候间差异性 　　细胞信号的正常转导保证着新陈代谢的正常运转，而不同的细胞信号产生不同的生理病理现象，造成在某一阶段产生证候的特异性，而这种特异性随着刺激因子性质或强度改变，或者机体抵抗力的强弱变化而发生改变，决定着证候的时间性。因此，我们可以看到中医证候一方面具有特异性，另一方面又不是固定不变的，以狼疮性肾炎(LN)为例，其中医主要病机特点是阴阳失调为本，热毒瘀血为标;病变涉及五脏六腑，而其中以肾脏病变最为常见[4]。阳晓等[5]以确诊并辨证分型为阴虚内热证的13例 、气阴两虚证的26例、脾肾阳虚的12例LN患者为研究对象，并设17例健康志愿者为正常组，探讨狼疮肾炎(LN )不同本虚证候患者外周血单个核细胞( PBMCs )内TNF-α信号通路主要受体衔接蛋白-TNF 相关死亡结构域蛋白( TRADD )、Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)、受体相互作用蛋白-1 (RIP-1 )和TNF受体相关因子-2 ( TRAF-2 )表达变化情况，发现各虚证患者PBMCs 中TRADD、FADD、RIP-1 和TRAF-2 mRNA 表达均不同程度低于正常组，其中气阴两虚组、脾肾阳虚组降低幅度较阴虚内热组相对较小，这些信号蛋白介导的凋亡信号可能参与了LN本虚证候的形成。脾为后天之本，脾虚证为临床常见病证，其与细胞信号转导方面的研究十分活跃，其研究主要集中在胞间信号分子(第一信使)上如：胃肠激素(胃泌素、P物质、胃动素、血管活性肠肽等)、以及环核苷酸信号转导，MAPK信号转导，磷脂酶介导的信号转导， Ca2+ /CaM-PK信号转导，以及酪氨酸激酶介导的信号转导，神经递质有经典递质，胆碱类递质,单胺类递质,神经肽类递质涉及脑肠肽、阿片肽等方面的研究,可见脾虚证时，胃泌素含量下降，P物质升高，胃动素升高，血管活性肠肽增多，细胞表面受体酪氨酸蛋白激酶(PTK)和胞内第二信使(蛋白激酶C，PKC)表达降低等等信号转导的异常改变，甚至以胃泌素和蛋白激酶C的表达异常区分出脾阳虚。不过脾气虚证、脾阳虚证、脾阴虚证间以及与其他脏腑证候间在信号转导方面的多部位、多系统、多层面的同步、动态比照研究相对较少，部分研究停留在动物实验是其原因之一[6~9]。也有从信号转导基因表达上探讨方证规律的，如丁汉荣等[10]以基因芯片技术从差异基因表达角度分析8名骨关节炎肾阳虚证与信号转导相关差异表达基因，本次试验结果差异表达基因中与信号转导元件相关的基因有28条，其中调节蛋白酪氨酸激酶的8条、丝氨酸/苏氨酸磷酸化激酶9条,与G蛋白相关的最多，共11条，而且大部分表现为下调。提示细胞间信号转导异常可能在肾阳虚证骨关节炎的发生、发展过程中起着重要作用。在外邪致病方面，同样也和信号转导之间关系密切，如湿热证多与内毒素转导信号有关，程方平等[11]观察湿热证大鼠内毒素特异性受体LBPmRNA、CD14mRNA、TLR4mRNA发现随着病程的发展，湿热证大鼠三者