IL-10和IL-33基因单核苷酸多态性与中山市汉族儿童哮喘易感性的关系.pdfVIP

广东医学 2013年4月第 34卷第8期 GuangdongMedicalJournal Apr．2013，Vo1．34，No．8 · 1239 · IL一1O和 IL一33基因单核苷酸多态性与 中山市汉族儿童哮喘易感性的关系冰 谭家余 ，黄湘 ，李冬秀 ，陈健锋 ，王冬娥 ，罗雅玲 广东省中山市博爱医院 中心ICU，产前诊断中心，检验科 (528403)；南方医科大学南方医院呼吸内科(广州 510515) 【摘要】 目的 探讨IL一1O和IL一33基因的单核苷酸多态性与中山市汉族儿童哮喘发病的相关性。方法 采用病例对照研究，利用MassARRAY—IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平 台(MALDI—TOF— MS)对 158例儿童哮喘和 198例健康对照的IL一10基因的rs1800896和IL一33基因的rs3939286位点进行基因分 型。结果 在中山市汉族儿童中rs1800896只检出AG和AA两种基因型，rs3939286检 出AA、AG和GG3种基 因 型，分型成功率为99．86％。与健康对照组相比，哮喘儿童 rs1800896的基因型分布差异有统计学意义( = 3．864，P=0．049)，但经Bonferroni校正后差异无统计学意义(P=0．098)，等位基因分布差异无统计学意义( = 3．639，P=0．056)。rs3939286的基因型分布( =9．988，P=0．007，P。=0．014)和等位基 因分布 ( =8．266，P= 0．004)差异有统计学意义。与GG基因型相比，rs3939286的AG和AA+AG基 因型均能明显增加哮喘发生的危 险性，OR值 (95％可信 区间)分 别为 2．230(1．243—3．997)和 2．361(1．324～4．210)。与 GG基 因型相 比， ~3939286的AA+AG基因型明显增加嗜酸性粒细胞计数 (Z=一2．962，P=0．003)和 IgE浓度 (Z=一3．628，P= 0．000)。结论 IL一33基因的rs3939286位点可能与中山市汉族儿童哮喘的发病有关。 【关键词】 支气管哮喘；IL一10；IL一33；单核苷酸多态性；基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱；儿童 哮喘既是一种 以气道高反应性为特征的气道慢 腹外周血2mL。 性炎症性疾病，又是一种遗传异质性疾病。现 已证实 1．2 试剂和仪器 DNA提取试剂盒 (天根生物技术有 许多基因的变异可能参与该病的发生 ，如 C3 、AD． 限公司，TIANampGenomicDNAKit)；低温超速离心机 AM33 、ORMDL3[31等。在哮喘的发病机制研究中，国 (Harris)；SpectroCHIP芯片 (Sequenom)；基质辅助激光 内外对 白细胞介素 (IL)一1O的单核苷酸多态性 (sin． 解吸电离飞行时间质谱仪 (SpectroREADER，Sequenom)。 glenucleotidepolymorphisms，SNPs)研究较多 ，但结论不 1．3 方法 完全一致 ，而对 IL一33的 SNPs研究甚少。本研究采 1．3．1 基 因组 DNA提取 用 TIANampGenomicDNA 用全新技术 MassARRAY—IPLEX技术和基质辅助激 Kit提取外周血 DNA，按说 明书操作，DNA保存 于 光解吸电离飞行时间质谱平台来探讨 IL一10和 IL～ 一 70℃备用。 33基因的SNPs是否与哮喘的易感性有关，为它们在 1．3．2 位点选择和 引物设计 选取 IL一10基因的 哮喘中的作用机制的研究打下基础。 rs1800896和IL一33基因的rs3939286位点为研究靶 1 资料与方法 点。采用 Sequenom公司的软件AssayDesign3．1进行 1．1 一般资料 按照中华医学会呼吸病分会哮喘学 引物设计并 由上海英骏生物公司(invitrogen)合成 ，其 组制定 的哮