IL-10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究.pdfVIP

东 南大 学学报 医 学版 · di、 2。…1。，，Jun；29(3)／：2…‘62—2…67 262 · JSoutheastUniv(MedSciE IL-1O基因内耳局部治疗 自身免疫性 感音神经性聋的实验研究 陈文博，谭长强，董伟达，李玉瑾，蔡文君，郭浪，李王伟 (南京医科大学第一附属医院暨江苏省人民医院耳鼻咽喉科暨耳鼻咽喉科学研究室，江苏 南京 210029) [摘要]目的：探索局部应用IL-10基因与慢病毒重组载体对实验性 自身免疫性感音神经性聋(ASNHL)的治 疗作用。方法：采用纯化 同种 内耳抗原免疫豚鼠，造成 ASNHL动物模型，再将重组载体分别经鼓阶、内淋 巴 囊和圆窗龛局部注射或渗透，观察听觉功能和 内耳病理形态学变化，同时行免疫组织化学试验了解慢病毒转 染和基因产物在 内耳的分布。结果：治疗前后ABRHI波阈值的均值对比分析结果显示，各实验组局部基因 治疗后均降低；治疗后各实验组组间比较差异无统计学意义。慢病毒主要转染部位是血管纹、Corti器、蜗轴 小血管周围及其 内淋巴囊等处。基因产物表达部位与转染部位基本相同。结论：重组载体经不同途径均可 转导入 内耳，并在 内耳表达基因产物，对ASNHL发挥有效的治疗作用。 [关键词]自身免疫性感音神经性聋；基因治疗；慢病毒载体 [中图分类号]R。33；R764．431 [文献标识码]A [文章编号]1671—6264(2010)03—0262—06 doi：10．3969／j．issn．167卜6264．2010．03．006 IL。10geneimportedintotheinnerearfortreatingautoimmune sensorineuralhearingloss：anexperimentalstudy CHENWen。bo，TANChang。qiang，DONGWei-da，LIYu-jin，CAIWen—jun， GUO Lang，LIWang-wei (DepartmentofOtorhinolaryngologyResearchLaboratoryofOtolaryngology．FirstAffiliatedHospitalto NanjingMedicalUniversityJiangsuProvinceHospital，Nanjing210029，China) [Abstract]0bjective：Toevaluatetherapeuticeffectsoftransferringrecombinantreplication—defectivelentiviral vectorofinterleukin IL。10 genewith GFP marked into innerearforlocally treating experimentalautoimmune sensorineuralhearingloss(ASNHL)inguineapig．Methods：Guineapigswereimmunizedwith58kDpurified conspecificinnerearantigenandcausedanimalmodelsofautoimmunesensorineural hearingloss．Theexperimental groupswithrecombinanttherapeuticgenevectorsinjectingintoinnerearthroughthreeapproaches(tympanicscale， endolymphaticsacandroundwindowmembrane)fortherapyofASNHL．Beofreandaftergenetherapy(7days)， auditorybrainstemresponse(ABR)thresholdsweredetermined，andtissueparaffinsectionsoftemporalbonewas made and observed by light microscopy and electron microscopy． Immunofluorescence and enzyme immunohistoch