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Klotho蛋白对高糖作用下人脐静脉血管内皮细胞凋亡和衰老的作用.pdf
广东医学 2015年8月第 36卷第 15期 GuangdongMedicalJournalAug.2015,Vo1.36,No.15 · 2323 ·
Klotho蛋白对高糖作用下人脐静脉血管内皮细胞
凋亡和衰老的作用 :l:
张军 ,代文静 ,周敬群 ,张家俊 ,曹志刚
三峡大学仁和医院 ICU科,心血管内科 (湖北宜昌443000)
【摘要】 目的 研究抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)凋亡和衰老的抑制
作用及其机制。方法 培养HUVECs细胞,设置c组(加同体积PBS培养基)、L组(加含低浓度5.5mmol/L葡萄
糖组培养基)、H组(加合高浓度 33.3mmol/L葡萄糖组培养基)、K1组(加含0.1~mol/LKlotho+33.3mmol/L葡
萄糖组培养基)、K2组(加含 1ixmol/LKlotho+33.3mmol/L葡萄糖组培养基)、K3组(加含 10~mol/LKlotho+
33.3mmoL/L葡萄糖组培养基),分别处理48h。SA—B一半乳糖苷酶染色法检测各组HUVECs细胞衰老情况;
RT—PCR方法检测各组 HUVECs中人端粒酶逆转录酶mRNA的表达情况;流式细胞术检测各组HUVECs的细胞
凋亡率;Western—blot法检测各组HUVECs中凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl一2表达情况。结果 与PBS对照组相
比,高浓度葡萄糖组中HUVECs细胞中sA—p一半乳糖苷酶染色阳性率显著上升 (P0.05),端粒酶逆转录酶
mRNA表达显著下降(P0.05)。而当不同浓度 Klotho蛋白和高糖同时作用HUVECs时,细胞中SA一31一半乳糖
苷酶染色阳性率逐渐下降(P0.05),端粒酶逆转录酶mRNA表达则逐渐上升 (P0.05);高浓度葡萄糖组 中
HUVECs细胞凋亡率显著上升 (P0.05),抑制凋亡 Bcl一2蛋白表达显著下降(P0.05),而促进凋亡Bax、p53
蛋白表达显著上升(P0.05)。不同浓度 Klotho蛋白和高糖同时作用 HUVECs时,细胞凋亡率逐渐降低 (P
0.05),抑制凋亡Bcl一2蛋白表达显著上升(P0.05),而促进凋亡Bax、p53蛋白表达显著下降(P0.05)。结论
抗衰老Klotho蛋 白能够抑制高糖诱导的HUVECs细胞衰老和凋亡,并通过诱导人端粒酶逆转录酶mRNA、Bcl一
2蛋白表达,抑制Bax、p53蛋白表达发挥作用。
【关键词】 Klotho蛋 白;高糖;人脐静脉血管内皮细胞;衰老;凋亡
Klothoproteininhibitsapoptosisandsenescenceofhumanumbilicalveinendothelialcellinducedbyhighglucose.
ZHANGJun ,DAIWen—jing,ZHOUJing—qun,ZHANGJia—jun,CAOZhi—gang. IntensiveCareUnit,RenheHos—
pital,ThreeGorgesUniversity,Yichang443000,China
Correspondingauthor:ZHOUJing—Qun.E—mail:zhoujingqun一1@medmail.con.cn
A【bstract】 Objective Toinvestigatetheinhibitoryeffectsofanti—agingKlothoproteinonapoptosisandsenes—
cenceofhumanumbilicalveinendothelialcell(HUVECs)inducedbyhighglucoseanditsmechanismofaction.Methods
HUVECsculturedinvitroweredividedintoPBScontrolgroup,low ucosegroup(5.5mmol/L),highglucosegroup
(33.3mmol/L),0.1mol/LKltho+33.3mmol/Lglucosergoup,1mol/LKltho+33.3mmol/Lglucosegroup.10mol/L
Kltho+33.3mmol/Lglucosergoup.andweretreatedaccordinglyfor48h.SenescenceofHUVECsineachgroupwasde—
terminedbySA—p—galactosidasestaining.Thehumantelomer
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