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L-ficolin(P35)与HCV和HBV感染的相关性.pdf
广东医学 2015年9月 第36卷第 l8期 GuangdongMedicalJournM Sep.2015,Vo1.36,No.18 · 2841 ·
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eta1.OnlineMRIguidanceforhealthytissuesparinginpatients (收稿 日期:2014—12—12 编辑:林培德)
L—ficolin(P35)与 HCV和 HBV感染的相关性
贺东黎
河南省南阳市中心医院消化内科一病区(473009)
摘【要】 目的 探讨L—fieolin与丙型肝炎(丙肝)病毒(HCV)、乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)感染的相关性,
为丙肝、乙肝的免疫治疗探索新的途径。方法 采用ELISA检测 103例丙肝、126例 乙肝患者血清中的L—ficolin
的含量,并与 126例正常人血清中的L—ficolin含量进行比较。同时,用荧光染料FITC(或PE)标记 L—ficolin的
抗体行流式细胞术(FCM)检测丙肝、乙肝患者外周血单个核细胞 (PBMC)和DC细胞内L—ficolin的表达。根据
以上两个实验 的结果将 HCV的各个基 因成分 包括 NS2、NS3、NS4-a、NS4b、Ns5a、NS5b、E1、E2、Core及 pblue—HBV
的真核表达质粒 ,与L—ficolin构建在pGL2载体上的启动子共转染到HepG2细胞,48h后收获细胞,用Luciferase
荧光报告基 因试剂盒检测细胞荧光,探讨是病毒的何种成分与L—ficolin表达相关。结果 夹心 ELISA法检测到
丙肝患者血清中的L—ficolin表达水平明显高于正常人(P0.05),而乙肝患者血清中的L—ficolin表达水平却比正
常人低 (P0.05)。FCM检测丙、乙肝患者的PBMC也得到同样的结果,且进一步发现L—ficolin可能主要表达在
DC细胞中。同时用HCV/HBV感染纯化的人 DC细胞 ,可见HCV感染的DC细胞中的L—ficolin升高,而HBV感
染的DC细胞中的L—ficolin降低,进一步验证上述的实验结果。用Luciferase荧光报告基 因试剂盒检测共转染病
毒各种基因成分与L—ficolin启动子得到的荧光值表明,HCV全基 因组以及部分基因如Core、NS4a、NS4b等能使L
— ficolin启动子荧光表达上升,而HBV复制子则使 L—ficolin启动子荧光表达下降。免疫组化结果显示正常人肝
组织表达L—ficolin蛋白,但是发生乙肝及丙肝感染癌变的组织中L—ficolin蛋白表达均下降甚至不表达。结论
L—ficolin在丙肝、乙肝患者体 内表达异于正常人,提示L—ficolin在对抗 HCV、HBV感染有一定作用。HCV能够
激活L—fico1in的启动子,而HBV可能抑制 L—ficolin启动子的激活。同时肝组织是产生L一 c0Jin蛋 白的场所,当
肝组织癌变。则L—ficolin蛋白表迭发生异常。提示L—ficolin蛋白与肝组织癌变相关。
【关键词】 L—ficolin;丙型肝炎病毒;乙型肝炎病毒;启动子
纤
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