LY294002和RAD001对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖与凋亡的影响.pdfVIP

广东医学 2015年 10月 第36卷第 20期 GuangdongMedicalJournalOct．2015，Vo1．36，No．20 · 3lO9 · LY294002和 RAD001对人乳腺癌 MDA—MB一231 细胞株增殖与凋亡 的影响术 怀磊，马斌林，杨乐，马斌 ，董朝，孙刚 新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科(乌鲁木齐 830011) 摘【要】 目的 研究mTOR和PI3K特异性抑制剂RAD001和LY294002对人乳腺癌MDA—MB一231细胞 株增殖与凋亡的影响。探讨PI3K／AKT／roTOR信号通路上下游不同靶点联合阻滞对人乳腺癌MDA—MB一231细 胞株的抗肿瘤效应及其机制。方法 体外RAD001和LY294002单独或者联合使用，通过M丌 实验计算药物半数 抑制浓度 IC 。应用流式细胞仪分析细胞周期分布及凋亡。结果 (1)LY294002和 RADO01抑制MDA—MB一 231细胞的活力值且呈剂量依赖性。(2)LY294002和 RAD001的IC 使 MDA—MB一231细胞停滞在 G 期 (P O．05)，联用的效应比单独用更显著 (P0．05)。(3)LY294002和RAD001单独使用时能显著增加人体MDA—MB一 23细胞的凋亡率 (P0．05)。联用时与单一药物使用相 比，MDA—MB一231细胞的凋亡率显著增加，联合用时 MDA—MB一231细胞凋亡率为52．67％。结论 PI3K／AKT／mTOR信号通路上下游不 同靶点联合干预时两药的 阻滞效应呈现相加作用，能够充分发挥抗肿瘤效应，抑制人乳腺癌MDA—MB一23l细胞的增殖并诱导细胞凋亡。 【关键词】 MDA—MB一231；RAD001；LY294002；PI3K；增殖与凋亡 近年来随着 内分泌治疗 以及抗人类表皮生长因子 231细胞株增殖与凋亡的影响，探究 RAD001与LY294002 受体2(HER一2)靶向治疗的研究进展和临床实施，乳 联合使用在三阴性乳腺癌靶向治疗中的作用。 腺癌的治疗效果得到显著改观。但是其中雌激素受体 1 材料与方法 (ER)、孕激素受体 (PR)与 HER一2均为阴性表达的 1．1 实验材料 三阴性乳腺癌，由于缺乏有效的靶 向及 内分泌治疗手 1．1．1 常用试剂 人乳腺癌细胞株 MDA—MB一231 段 ，治疗效果欠佳 。这一亚型乳腺癌患者具有相似的 由中科院细胞库提供；RAD001与 LY294002购 自Sel1． 特征、极高的同源性，组织分化往往较差 ，多属于基底 eck公司；RAD001与LY294002均与二 甲基亚砜 (DM． 样乳腺癌。由于缺乏针对这类特殊类型乳腺癌的治疗 SO)配置成 100mmol／L溶剂 ；DMSO、青链霉素双抗、 指南，目前仍按常规标准方式进行治疗 ，但局部复发和 DMEM培养基、0．25％EDTA胰酶均购 自GIBICO公 远处转移率均较高。已有研究发现多种信号通路参与 司；优质胎牛血清购 自碧云天生物技术研究所 ；PBS缓 癌症细胞增殖与分化的调控 ，这些信号通路存在于大 冲液购 自HyClone公司。细胞增殖与细胞毒性检测试 多数细胞内，将细胞外刺激信号转导至细胞及其核内， 剂盒 (CCK一8)、凋亡检测试剂盒、周期检测试剂盒均 并引起细胞生物学反应 (如细胞增殖 、分化 、转化及凋 购 自BestBio公司。 亡等)。其中PI3K／AKT、Ras—Raf、JAK—STAT、WNT、 1．