NF-κB介导ADMA上调大鼠腹腔巨噬细胞LOX-1的表达.pdfVIP

第 39卷第 6期第 771页 华 中科技大学学报 (医学版) VO1．39 No．6 P．771 2010年 12月 ActaMedUnivSciTechnolHuazhong Dec． 2010 NF—KB介导 ADMA上调大 鼠腹腔巨噬细胞 LOX-1的表达 徐 雪晶 ， 何 军 ， 张新金 ， 文 渊 ， 马业新△ 华中科技大学同济医学院附属同济医院心 内科 ，武汉 430030 摘要 ：目的 探讨非对称性二 甲基精氨酸 (ADMA)上调大 鼠腹腔 巨噬细胞 的氧化低密度脂蛋 白受体一1(LOX一1)表 达是否受核因子一B(NF_B)的调控 。方法 分离培养大 鼠腹腔 巨噬细胞 。实验分组 ：正常对照组，以含 1o 胎牛血清 (FBS)DMEM培养液与巨噬细胞共孵育 ；氧化型低密度脂蛋 白(oxLDL)组，在培养液 中加 oxLDL(50rag／L)；A+O组， 在培养液中加 ADMA(15~mol／L)和oxLDL(50mg／L)；P+A+O组 ，在培养液 中加吡咯烷二硫代氨基 甲酸盐 (PDTC， 25~mol／L)、ADMA(15／lmol／L)、oxLDI(5Omg／L)。以实时荧光定量 PCR(Real—timePCR)和 Westernblot分别检测 LOX一1mRNA和蛋 白表达 ，以电泳迁移率变动分析 (EMSA)和增强化学发光法 (ECL)检测 NF-~B活性 。结果 oxLDL 组与 A+0组 L0X一1mRNA和蛋 白表达 比对 照组 明显增强 ，以A+0组尤为 明显 (均 P0．05)；P+A+O组 LOX一1 mRNA和蛋 白表达较 A+0组降低(PO．05)。与对照组相 比，oxLDL组与 A+O组 NF-~B活性明显增强，以A+0组 尤为明显(均 P％0．05)；P+A+O组 NF-~B活性较 A+0组降低 (P％0．05)。相关分析 ：NF-~B活性与 LOX一1mRNA 和蛋 白表达量呈正相关(均为 r一0．82，P％0．05)。结论 ADMA可能通过 NF_KB途径增强 L0X一1表达而促进 巨噬细 胞转化为泡沫细胞 ，促进动脉粥样硬化 的发生发展 。 关键词 ：核因子一B； 非对称性二 甲基精氨酸 ； 氧化型低密度脂蛋 白受体 ； 巨噬细胞 ； 动脉粥样硬化 中图分类号 ：R349．5 DoI：10．3870／j．issn．1672—0741．2010．06．009 AsymmetricDimethylarginineInducestheExpressionofLOX一1viaNF—KB Pathway in PeritonealM acrophagesofRats XuXuejing ，HeJun ，ZhangXinjinetal DepartmentofCardiology，TongJiHospital，TongjiMedicalCollege，Huazhong UniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China Abstract Objective Toinvestigatewhethertheexpressionofleetin—likeoxidized1owdensitylipoproteinreceptor-1(L0x_ 1)inperitonealmacrophagesofratsupregulatedbyasymmetricdimethylarginine(ADMA)ismodulatedbynuclearfactorkappa B(NF_KB)pathway．Methods Wistarratperitonealmacrophageswereculturedandisolated，anddividedintofourgroups：① Contro1group：mac