Nrf2通过上调自噬促进C17.2神经干细胞的增殖.pdfVIP

第37卷 第4期 中山大学学报 (医学科学版) V01．37 No．4 2016年 7月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) July 2016 · 基础研究 · Nrf2通过上调 自噬促进C17．2神经干细胞的增殖 杨晓红 ，王胜男 ，刘庆余 ，欧阳颖 ，李 民 ·，皮荣标 (中山大学 1．药学院，广东 广州 510006；2．孙逸仙纪念医院，广东广州 510120) 摘 要：【目的】通过使用化合物调控细胞内信号通路，最终引起脑内神经干细胞的增殖和分化。这被为认为是一种崭 新的修复受损大脑功能的治疗策略。我们发现Nrf2能够调控C17．2神经干细胞的增殖，并试图阐明其可能的作用机制。方【 法】采用MTr法检测细胞活力，Brdu掺人法检测细胞增殖，westernblot法检测细胞内蛋白水平的变化，流式细胞术检测细胞 内ROS水平的变化。【结果】Nrf2的激动剂t-BHQ和SFN可以促进C17．2神经干细胞的增殖，而使用Nrf2的抑制剂brusatol 则抑制其增殖。然而无论是Nrf2的激动剂还是抑制剂均对细胞内的ROS水平没有影响，但是通过 卜BHQ和SFN激活Nrf2 能降低H20导致的C17．2细胞损伤。此外 ，我们观察到t-BHQ和SFN能增加细胞 内LC3lI的蛋白水平以及GFP—LC3点子 的数 目，而brusatol则具有相反的作用。过表达 Nrf2不仅导致 LC3I向Ⅱ的转变 ，还能促进 C17．2细胞的增殖 ．而加入 自噬的 抑制剂NH4C1和cQ则能部分逆转Nrf2导致的C17．2细胞增殖。 【结论】Nrf2能够促进C17．2干细胞的增殖，这可能与其升 高细胞内的 自噬水平相关，而不是与细胞内ROS的水平相关。 关键词 ：Nrf2；神经干细胞 ；增殖 ；ROS；自噬 中图分类号：R966 文献标志码 ：A 文章编号：1672—3554(2016)04—4081—09 Nrf2PromotesC17．2NeuralStem CellProliferationviaUp-RegulatingAutophagy YANGXiao—hong，WANGSheng—nan，LIUQing—yu，OUYANGYing~，LIMin，PIRong—biao (1．SchoolofPharmaceuticalSciences，SunYat—SenUniversity，Guangzhou510006，China；2．SunYat—SenMemofiMHospital，Sun Yat—SenUniversity，Guangzhou510120，China) Correspondingto：PIRong—biao，E—mail：pirb@mail．sysu．edu．cn Abstract：O【bjective】Inordertorepairorrestorethefunctionofdamagedbrain，toregulatesignalingpathwaybychemicals， whichultimatelyleadstoendogenousneuralstemcells(NSC)proliferationanddifferentiation，hasbeenregardedasannewtreatment strategy．Here，wefoundtheeffectsofnuclearfactorerythroid2-relatedfactor(Nrf2) onC17．2cellprolfieration， andtriedto illuminateitspossiblemechanisms．M【ethods】CellviabilitywastestedbyMTrassay，andcellproliferationwasmeasuredbyBrdU incorporationassay． InrtacellularROSformationwasmonitoredbyflo