5-氟尿嘧啶及甲酰四氢叶酸钙联合用药对乳腺癌细胞凋亡影响.pdfVIP

5．氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸钙联合用药对乳腺癌细胞凋亡的影响 摘要 和低毒副作用的特征，目前己成为临床治疗恶性肿瘤如胃肠道癌、肝癌、乳腺癌等首选 的化疗药物。但同时也发现，在不同的癌症治疗过程中，使用该药物表现出来的药效不 同，而且难以逃脱目前众多抗癌药物本身带来的毒性大等缺点，使其在应用上具有一定 的局限性。随着现代医药生物技术的发展，为提高5．氟尿嘧啶的药效，采用5．氟尿嘧啶 与其它药物联合使用，极大地提高了药物的效用。但是，关于5．氟尿嘧啶与其它药物联 合使用的种类、剂量．药效关系以及细胞机制尚不完全清楚。 研究发现，还原型叶酸．甲酰四氢叶酸钙(CF)作为核酸合成的重要辅酶对5．Fu有 增效的作用，其优点是毒副作用较轻。因此，本文用5．氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸钙联合 使用处理人乳腺癌细胞MCF．7，通过M1]r}去检测药物毒性及其对细胞增殖的影响；利用 琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状带、荧光染色观察细胞核的形态变化、流式细胞检测分析 凋亡细胞的周期变化；凋亡相关蛋[刍Bcl．2、Bax等的动态变化，比较了联合用药和单独 用药对细胞凋亡的影响，探讨了联合用药可能的机制，旨在为临床提高恶性肿瘤化疗的 疗效，减少药物的毒副作用提供一定的理论和实验依据。 结果如下： (1)5．氟尿嘧啶单独作用于乳腺癌细胞株MCF．7产生的抑制效应随时问的延长而 增加；不同浓度的5．氟尿嘧啶与不同浓度的甲酰四氢叶酸钙作用于MCF-7细胞，5．氟 钙剂量的增加而增强。相同时间内，单独用5．氟尿嘧啶作用于MCF．7细胞较之与叶酸 联合作用的抑制效应差。5．氟尿嘧啶联合使用较单独使用效果要好，且与甲酰四氢叶酸 钙的联合抑制作用最佳； (2)细胞形态学检测发现，凋亡细胞体积变圆，胞浆浓缩，核DNA固缩深染，贴 壁能力很差，有的已经脱落至培养液中。早期凋亡细胞的细胞膜正常，呈圆珠状小体， 晚期凋亡细胞被染成红色，其核形态与早期凋亡细胞相近。坏死细胞体积明显变大，呈 不均匀的橙红色荧光，也有的已经变成颗粒状无定形状的碎片。随着5．氟尿嘧啶浓度的 增加，凋亡细胞的比例呈剂量依赖型；琼脂糖凝胶电泳时，凝胶成像系统下可观察到凋 亡小体。流式细胞仪检测过程中，可以明显看到凋亡峰，并且中期细胞增多。早期凋亡 (3)5．氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸钙作用于MCF-7细胞后，分别加入相对应的一抗、 Bax表达升高的结果。 结论： (1)5．氟尿嘧啶不论是单独作用还是联合作用，都对乳腺癌MCF-7细胞产生抑制 5．氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸钙联合用药对乳腺癌细胞凋亡的影响 作用，其作用效果有差异，5．氟尿嘧啶联合使用较单独使用效果要好，且与甲酰四氢叶 酸钙的联合抑制作用最佳。5．Fu联合CF诱导癌细胞凋亡有明显的时间、剂量依赖性。 (2)5．Fu具有明显的诱导人体外癌细胞凋亡的作用，随着5．氟尿嘧啶剂量的增加， 5．氟尿嘧啶联合甲酰四氢叶酸钙导致MCF-7细胞早期凋亡率明显增加，晚期凋亡细胞也 有递增之势。 加，同时Bcl．2／Bax的比率亦随时间延长及剂量的增加而逐渐下降。5．氟尿嘧啶联合甲 酰四氢叶酸钙诱导MCF-7细胞凋亡与Bcl．2降低、Bax增加有关。 Bax 关键词：细胞凋亡5一氟尿嘧啶甲酰四氢叶酸钙BcI-2 5．氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸钙联合用药对乳腺癌细胞凋亡的影响 Abstract aanti—tumor is in of possession 5-Fluorouracil(Fluorouracil，‘5一Fu)isdmg，which andlow hasbeenthefirstchoosein speediness，highefficiency toxicity,and drugmalignant cancer tract SOon．