转染肿瘤细胞总RNA的树突状细胞联合CIK细胞抗小鼠肝癌作用的实验研究.pdfVIP

广西医学 2012年4月第34卷第4期 403 转染肿瘤细胞总 RNA的树突状细胞 联合CIK细胞抗小鼠肝癌作用的实验研究▲ 罗善超 刘剑勇 赵荫农 张志明 崔 英 张春燕 张力图 (1广西玉林市骨科医院，玉林市 537000，E—mail：luoshanchao@126．com； 2广西医科大学附属肿瘤医院，南宁市 530021) 【摘要】 目的 探讨转染小鼠肝癌H22细胞总RNA的树突状细胞 (DC)疫苗体外抗小鼠肝癌的免疫作 用。方法 提取小鼠四肢长骨骨髓，在rmGM—CSF和 rmlL-4体外刺激下增殖分化为DC。制备小鼠脾淋巴细 胞，在体外经珊IFN一 anti—CD3、rmlL-2和 rmIL-lb诱导成为细胞因子诱导的杀伤性细胞 (CIK细胞)。制备肝 癌H22细胞总RNA，体外转染DC，流式细胞仪检测转染前后的DC表面分子的表达情况。将转染H22细胞总 RNA的DC和 cIK细胞混合培养制备成为效应细胞，LDH释放法测定效应细胞对小鼠H22细胞、S180细胞的 杀伤活性。结果 经H22细胞总RNA转染后的DC，其MHC I类分子、MHCII类分子及CD83、CD86表达率 明显增高，CD14表达率降低 (P0．05)。转染H22细胞总RNA的DC激活的CIK细胞对H22细胞的杀伤率 高于其对 S180细胞的杀伤率(P0．05)。转染H22细胞总RNA的DC激活的CIK细胞对 H22细胞的杀伤率 高于其他各组效应细胞对 H22细胞的杀伤率(P0．05)。结论 转染H22细胞总RNA的DC激活的CIK细 胞对 H22细胞具有高效而特异性的体外抗小鼠肝癌免疫作用。 【关键词】 肝癌；树突状细胞；总RNA转染；CIK细胞 【中图分类号】 R735．7 【文献标识码】 A 【文章编号】 0253-4304(2012)04-0403-04 StudyonAnti--mouseHepatocellularCarcinomaEffectofCytokine--inducedKillCeHsActivated byDendriticCeHsTransfectedW ithMouseHepatocellularCarcinomaTotalRNA in vitro LUOShan—chao，LIUJian—yong，ZHAOYin—nong，ZHANGZhi—ming，CUIYing，ZHANGChun—yan，ZHANGLi—tu (1OrthopaedicHospitalofYulinCity，Yulin537000；2AffiliatedTumorHospital，ofGuangxiMedcialUniversity，Nanning530021，China) A【bstract】Objective Toinvestigateanti-mousehepatocellularcarcinoma(HCC)effectofeytokine—inducedkiller cells(CIK)activatedbydendriticceHs(DC)transfectedwithmouseHCCtotalRNAinvitro．Methods TheDCprecursom nadDCharvestedfrom thebonemarrowwereincubatedwithrecombinnatmurinegranulocytemareophage—colonystimulating factor(rmGM-CSF)nadrecombinantmurineinterleukin-4(rmIL-4)invitro．Splenocyteswereisolatedfrommousespleen． NonadherentsplenocyteswereinducedtoCIKbyrecombinnatroutineIFN—gamma(rmIFN一)，nati—mouseCD3(anti—CD3)， recombinnatmurineintedeukin-2(rmIL一2)，recombinantmurineIL-lb(rmIL-lb)invitro．Tumo