动物试验的基本操作技术.docVIP

第二章 动物实验的基本操作技术 一、动物实验的方法 生理学实验是以活的动物或人体作为观察对象和实验材料。在动物实验中，活体解剖技术对生理学实验的成败起着十分重要的作用。在实验过程中，学生应着重于学习、掌握这些操作技术，以提高动手能力。生理学实验方法虽然多种多样，但一般可分为离体实验法和在体实验法两类。而在体实验法又分为急性实验和慢性实验两种。 急性实验就是用活体解剖的方法，把失去知觉的动物（全麻或局麻下）某一功能系统、器官或组织，暴露于直视之下，或置于实验仪器的准确控制之下（活体解剖实验方法）；或用适当的方法把所需器官或组织从动物体内取出，置于人工环境中，给予人工处置（离体器官实验方法），然后观察其活动与反应，以研究其功能或其对某种外加因素的反应及其机制的一类动物实验的总称。急性实验的优点是，通过对实验条件的严格控制，可排除一些复杂因素的影响，在较短时间内获得较多的有价值的分析材料。其缺点是，由于动物处于失常状态，如麻醉、创伤、失血等，使实验结果不能完全反映整体动物在生理条件下功能活动的规律。 慢性实验是指在无菌条件下，给动物施行一定的实验外科手术，待其恢复健康后再行实验和观察；或者将一定的物理性、化学性和生物性等致病因素作用于动物，复制成各种疾病模型，详细研究和观察疾病的发生、发展的规律或各种实验性治疗措施的效果。慢性实验的最大优点是保持了实验动物机体的完整及其与外界环境的统一性，动物处于比较接近自然的生活状态。因此，所观察到的实验结果比较符合于客观实际，也比较正确可靠，但由于观察时间长，对实验设备和技术要求高，影响因素较多，花费的人力也比较多等，因而难度较大。故基础课教学中较少采用，而广泛应用于研究工作中。 二、常用实验动物的种类及特点 在医学领域内，人们常利用实验动物的某些与人类相近似的特性，通过急性或慢性动物实验，对人类的生理、病理生理过程及其机制进行探索。常用的实验动物有蛙、小白鼠、大白鼠、家兔等，要根据实验的性质选择适当的动物。 1、蟾蜍和青蛙 蟾蜍和青蛙均属于两栖纲，无尾目，是实验教学中常用的小动物，其坐骨神经－腓肠肌标本可用来观察各种刺激或药物对周围神经、骨骼肌或神经肌肉接头的作用。它们的离体心脏在适宜的环境中能较持久地、有节律地搏动，常用于研究药物对心脏的作用。蛙舌与肠系膜是观察微循环的良好标本。 2、小白鼠 属哺乳纲，啮齿目，鼠科，是医学和运动生理实验中用途最广泛和最常用的动物。因其繁殖周期短，繁殖量大，生长快，温顺易捉，操作方便，又能复制出多种病理模型，适用于需要大量动物的实验。如药物的筛选、半数致死量或半数有效量的测定等。也适用于缺氧、运动等方面的研究。但不同品系的小鼠对同一刺激的反应性差异较大。 3、大白鼠 属哺乳纲，啮齿目，鼠科。性情不如小白鼠温顺，受惊时表现凶恶，易咬人。雄性大白鼠间常因发生斗殴而咬伤。但具有小白鼠的其他优点且用途广泛，可用于胃酸分泌、胃排空、水肿、炎症、休克、心功能不全、黄疽、肾功能不全等方面的研究。它还可用于进行高级神经活动的肾上腺、垂体等内分泌以及能量代谢实验。与小鼠相似，大鼠的实验动物模型较稳定，一些在小鼠身上不便进行的实验可选用大鼠。 4、家兔 属哺乳纲，啮齿目，兔科。家兔品种很多，常用的有：①青紫蓝兔：体重强壮，适应性强，易于饲养，生长较快；②中国本地兔（白家兔）：抵抗力不如青紫蓝兔；③新西兰白兔：是从国外引进的大型优良品种，成熟兔体重在4～5.5kg；④大耳白兔：耳朵长而大，血管清晰，皮肤白色，但抵抗力较差。 兔耳血管丰富，耳缘静脉表浅，易暴露，是药物注射的良好选择部位。其主动脉神经颈部自成一束称为降压神经（或缓冲神经），便于研究降压神经与心血管活动的关系。家兔性情温顺，便干灌胃和取血，是生理学中最常用的动物之一，可用于血压、呼吸、尿生成等多种实验，还可用于代谢障碍、酸碱平衡紊乱、缺氧、发热等方面的研究。 5、豚鼠 又称荷兰猪，属哺乳纲，啮齿目，豚鼠科。性情温和，对组胺敏感，并易于致敏，常用于离体心脏实验和钾代谢障碍、酸碱平衡紊乱的研究。另外，豚鼠的前庭器官、听觉器官较为发达，乳突部骨质较薄，常用于耳迷路破坏实验及微音器效应观察。 6、猫 属哺乳纲，食肉目，猫科。猫的血压比兔的稳定，观察血压反应比兔好。猫的神经系统较发达，可用于去大脑僵直、姿势反射等实验。 7、狗 属哺乳纲，食肉目，人科。狗的嗅觉比人灵敏，对外环境适应力强，血液、循环、消化和神经系统均很发达，与人类较接近，易驯养，经过训练能很好地配合实验，适用于许多急、慢性实验，尤其是慢性实验，是最常用的大动物。但由于价格较昂贵，故常用于血压、酸碱平衡、弥散性血管内凝血、休克等大实验，在教学实验中不如一些中、小动物常用。 三、常用动物的捉拿和固定方法 一般动物在实验前禁食12小时，但饮水不限。进行慢