微生物学课件培养基的配置.ppt

课外： 名校精品课程 /s/blog_49809631010005tn.html 微生物学相关： 华中农业大学 /kech/wswx/cn/syzd/video.htm 河南农业大学 49/jpkc/smqiuliyou/ 华南师范大学 /jpkc/wswx/course_contents/experiment_teaching.htm 理论课： 微生物学原理与探索 yanxin@ 实验四 微生物培养基的配制 一. 实验目的 1. 掌握培养基配置的步骤。 2.了解常见的灭菌方式，掌握高压灭菌的原理及操作。 3. 掌握基本实验器材的包扎。 二. 实验原理 培养基的概念： 由人工配制的能够满足微生物生长、繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。 培养基的六大营养因素： 碳源： 氮源： 能源： 生长因子： 无机盐： 水： 二.培养基的类型 1、按照培养基物理性状 固体培养基(solid medium) ?在培养基中加入凝固剂(琼脂，1.5-2.5%)，使培养基呈固体状态。 ? 液体培养基(liquid medium) ?未加凝固剂呈液体状态的培养基。 ? 半固体培养基(semisolid medium) ?在液体培养基中加入少量（0.2%-0.7%）琼脂制成半固体培养基。 2、按照培养基用途 基本培养基(minimum medium) ?不少微生物需要的营养物质，除少数几种外，大部分是相同的，因此，可以按照基本营养成分配制成一种培养基 ，这种培养基 就成为基本培养基 。? 富集培养基(enrichment midium) 在自然情况下，各种微生物总是混杂在一起生长的，为了分离某种微生物，可以根据这种微生物的营养要求，配制出适合它生长而不利于其他微生物生长的培养基。? 鉴别培养基(differential medium) 根据微生物的代谢特点，通过指示剂的显色反应，用于鉴别不同微生物的营养基称为鉴别培养基 。 3、按照培养基的成分 合成培养基（synthetic medium） ? 这类培养基中营养物质的浓度和化学成分完全清楚，组分成分精确，重复性强，但微生物在这类培养基中生长缓慢。 ? 天然培养基(natural medium) ? 采用动、植物组织或微生物浸出物，如牛肉膏、蛋白胨、麦芽汁、玉米粉、马铃薯、牛奶、血清、酵母膏等为原料配制而成。 ? 半合成培养基(semisynthetic medium) 介乎于合成培养基和天然培养基之间，由成分确定的化学药品和天然动、植物组织或微生物浸出物组合而成。 灭菌和消毒技术 1. 火焰灼烧 2. 干热灭菌 3. 湿热灭菌 常压蒸汽灭菌 ：巴氏消毒法，间歇灭菌法， 蒸汽持续灭菌法 高压蒸汽灭菌： 4. 过滤除菌 5. 紫外线杀菌 6. 化学药剂消毒和杀菌 热蒸汽 121oC, 25min 115oC, 35min 加水， 装锅，升压保压，降压与排气， 出锅，烘干。 高压蒸汽灭菌 三. 培养基配置实验方法 成分的换算 原料称量，溶解 牛肉膏，淀粉 定容 调节pH：酸碱 分装 液体：试管 ?，锥形瓶1/3 固体：锥形瓶 ? 称量琼脂(2%) 塞棉塞和包扎 四. 培养基配置种类 肉汤蛋白胨 固体 1.5L（500ml 三角瓶分装 X 5） 马丁氏培养基 固体 1.5L （500ml 三角瓶分装 X 5） 高氏一号 固体 1.5L 同上 淀粉培养基 固体 1.5L 同上 葡萄糖蛋白胨水培养基 液体 5ml/试管 50 支 蛋白胨水培养基 液体 5ml/试管 50支 无菌水 4.5ml/支 50 支 无菌水 90ml/250ml三角瓶 5 瓶(10颗玻璃珠) 五、 思考题 P68 ， Q 1， 2 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *