川芎嗪对凝血酶诱导血管内皮细胞组织因子表达影响及机制的研究.pdfVIP

川芎嗪对凝血酶诱导血管内皮细胞组织因子 表达的影响及机制研究 摘要 组织因子(tissuefactor，TF)是体内生理性止血和病理性血 栓形成中凝血反应的重要启动因子。TF是～种跨膜糖蛋白，它既是凝 动凝血过程。 最近的研究表明，TF除了参与凝血过程以外，还参与炎症反应。 在凝血一炎症网络中，血管内皮细胞表达的TF是炎症和血栓形成的重 要衔接物之一。血管内皮细胞通过产生不同的促凝和抗凝活性物质， 维持凝血与抗凝系统之间的平衡，调节生理性止血和病理性血栓形 成。血管内皮细胞、单核细胞表达TF异常与许多疾病过程中的血栓 事件密切相关，包括动脉粥样硬化、败血症、急性心脑血管血栓栓塞 事件和DIC等等。许多炎症细胞因子可以刺激血管内皮细胞和单核细 与凝血反应，促使血栓性疾病的发生发展外，也参与体内炎症反应。 取的有效成分，化学结构为四甲基吡嗪。川芎嗪具有细胞保护、抗氧 化、抗血小板聚集等多种作用。但川芎嗪是否影响凝血酶诱导的血管 内皮细胞促凝活性增加及其机制尚未见报道。 TF 研究目的①观察凝血酶对人脐静脉血管内皮细胞株ECV304 表达的影响以及TMP对其的干预作用；②探讨TMP干预凝血酶诱导血 管内皮细胞TF表达的作用机制。 培养基；MTT测细胞活力；一期凝固法测总的细胞促凝活性(PcA)； 采用RT—PCR的方法检测TFmRNA；免疫组织化学染色观察NF—KB的 变化。 +本课题受教育部优秀青年教师资助计划项目(教人司(2001)39号)和湖南省 自然科学基金课题(04JJ6014)资助 、 结果①不同浓度的凝血酶(1．25～20U／m1)能呈剂量依赖性 U／ml达 p 到峰值。②单用TMP(125一--i000 min用TMP(1251000Il 响(p0．20)。但在给予凝血酶之前30 g／m1) 预处理ECV304细胞，凝血酶(20U／m1)刺激ECV304细胞 PCA(r一0．9644，p0．01)和TF 用明显地受抑制，并存在显著量效关系，i000ng／m1时其抑制作用最 血酶促进ECV304细胞PCA和TF mRNA增加的作用(p0．05)。④免疫 组织化学染色发现凝血酶作用45min可引起ECV304细胞NF—KB从 胞浆移入核内；TMP预处理15min可抑制凝血酶引起的ECV304细胞 内NF—KB的转位。 平抑制凝血酶刺激ECV304细胞TF表达的作用；②N0途径参与了TMP 抑制凝血酶诱导ECV304细胞TF表达的作用；@TMP和凝血酶可能通 过影响NF—KB的活化来改变TF的表达。 关键词川芎嗪，凝血酶，组织因子，血管内皮细胞，细胞信号 转导 Ⅱ Effectsof onthe of tetramethylpyrazineexpression tissuefactorinducedthrombinanditsmechanism by invascularendothelialcells ABSTRACT Tissue membrane is锄initiatorin factor(TF)，aglycoprotein， hemostasisand thrombosis．Itisnot the physiological pa