HPLC测定四季感冒片中5-0-甲基维斯阿米醇苷含量.docVIP

HPLC测定四季感冒片中5-0-甲基维斯阿米醇苷含量(1．辽宁中医药大学职业技术学院，辽宁沈阳110010；2．辽宁省医药工业研究院，辽宁沈阳110015) 摘要：采用高效湘相色谱法测定四季感冒片中5-0-甲基维斯阿米醇苷含量。色谱柱：DiamonsilTM(钻石)Cμ柱(5μ，200mm×4.6mm)；流动相：乙腈一水溶液(1:5)；流速：0.65mL/min。检测波长：290nm。5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品进样量在5.05～35.35μg/mL范围内呈现良好线性关系，r=0.9997，平均回收率为101.1％，RSD为1.224％(n=6)。本方法简便，重现性好。 关键词：HPLC；四季感冒片；5-0-甲基维斯阿米醇苷 中图分类号：R284.1　文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)05-1039-02 四季感冒片是由桔梗、紫苏叶、陈皮、荆芥、大青叶、连翘、甘草、香附(炒)、防风等提取物和辅料混合而制得，具有清热解表功效。临床上用于四季风寒感冒，特别适用于体弱者，妊娠妇女因感冒引起的头热头痛，鼻流清涕，咽喉疼痛，恶心厌食等。原标准中无含量测定方法，不利于该药品的质量控制。本文参考有关文献，运用HPLC测定四季感冒片中5-0-甲基维斯阿米醇苷含量。本方法精密度高，分离效果好，平均加样回收率101.1％。 1仪器与材料 1.1仪器　大连依利特分析仪器有限公司200Ⅱ高效液相色谱仪，UV 200紫外可变波长检测器，EC2000色谱工作站；色谱柱：DiamonsilTM(钻石)C18柱(5μm，200mm×4.6mm)；赛得为利斯DP211D电子分析天平；SCIENCE-ASl0200数控超声波清洗器(天津奥赛特仪器有限公司)； 1.2试剂 乙腈、甲醇为色谱纯，水为重蒸水。5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品，由中国药品生物制品检定所提供。批号：111523-200404。 2实验方法与结果 2.1色谱条件　以乙腈一水溶液(1:5)为流动相，流速为0.65mL/min。选定290nm做测定波长，在此条件下，样品中5-0-甲基维斯阿米醇苷与其它成分峰能很好的分离。 2.2标准曲线的绘制　精密量取5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品10.1mg，置50mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；分别精密量取0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、1.75mL置10mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL中分别含5-0-甲基维斯阿米醇苷5.05、10.10、15.15、20.20、30.30、35.35μg的对照品溶液。分别精密量取上述溶液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积。以5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品的浓度(μg/mL)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。其回归方程为A=3.14×104C+8.88×102，相关系数r=0.9997，结果表明，5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品在5.05～35.35μg/mL范围内线性良好。 2.3精密度实验　精密量取同一供试品溶液10μL注入液相色谱仪，重复进样6次，求得相对标准偏差。结果RSD为1，224％。实验表明本色谱系统精密度良好。 2.5供试品溶液的制备的测定①供试品溶液和对照品溶液的制备：取重量差异项下四季感冒片，除去薄膜衣后研细，取细粉1.0g，精密称定，置圆底烧瓶中，加甲醇25mL，称定重量，加热回流2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得。对照品溶液的制备：取5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含20μg的溶液，即得。 ②供试品溶液的测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL分别注入液相色谱仪，测定，即得。 3讨论 在实验中采用回流提取、超声提取等方法进行实验，并比较了回流提取方法的不同时间，结果表明用甲醇溶液水浴加热回流2h提取完全。 5-0-甲基维斯阿米醇苷的测定，文献报道以甲醇一水溶液(4:6)为流动相，该方法不适用于四季感冒片中5-0-甲基维斯阿米醇苷的测定；经摸索以乙腈-水溶液(1:5)为流动相，可提高5-0-甲基维斯阿米醇苷分离度。 流速选择：曾试用了0.5、0.65、0.8mL/min共3种流速进行试验，结果流速为0.65mL/min情况下5-0-甲基维斯阿米醇苷色谱峰与其它成分的峰较好的分离。故仍采用0.65mL/min的流速。 5-0-甲基维斯阿米醇苷为四季感冒片中防风药材中所含有效成分，为提高药品质量确保疗效，采用HPLC测定四季感冒片中5-0-甲基维斯阿米醇苷含量，该方法简便快速，经加样回收实验及精密度实验，证明该方法准确可靠。 注