昆明小鼠胚胎成纤维细胞分离培养及应用.pdfVIP

解剖科学进展 Progress of Anatomical Sciences 2008 ,14(1):19-23 昆明小鼠胚胎成纤维细胞分离培养及应用 董韬，纪红，秦逸人，金连弘，刘慧雯. (哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室，黑龙江哈尔滨 15∞81 ) 【摘要】目的 探讨昆明小鼠胚胎成纤维细胞培养及应用。方法 取昆明小鼠胚胎分离成纤维细胞，用丝 裂霉素C处理成纤维细胞为胚胎干细胞制备饲养层，消化贴壁成纤维细胞为核移植提供供体细胞。结果 13.5d、 14.5d 、 15.5d孕鼠均可分离出成纤维细胞， 14.5d孕鼠制作的成纤维细胞形态规则， 3-5代成纤维细胞经处理可作 饲养层，可作核移植供体细胞。结论 昆明小鼠可分离成纤维细胞，用于饲养层制作及核移植供体细胞。 【关键词】胚胎成纤维细胞;饲养层;核移植;胚胎干细胞 【申图分类号 1 R321 【文献标识码 1 A [文章编号 1 1 ∞6-2947 (2∞8) 01-∞19-05 Culture and Application ofKunming Mouse Embryonic Fibroblasts DONG Tao, JI Hong , QIN Yi-Ren , JIN Lian-hong,LlU Hui-wen (Department of histology and embryology,Harbìn Medìcal Unìversity ,Harbìn 15∞81 ，chìna) [ Abstract 1 Objective To study the isolation and culture and application of Kunming mouse embryonic fibroblasts(ME F). Method We isolated MEF from the embryos of Kunming mouse . Mitomycin C w田 used to pretreat MEF for feeder layers of embryonic stem cell and MEF w田 digested for donor cells of nuclear transfer. Resu1t MEF cells could be isolated from 13.5-15 .5 d pregnant mouse , MEF cells from 14.5d pregnant mouse grew well wi由 regular shape, 3- 5generation MEF cells can be made of feeder layers and donor cells for nuclear transfer. Conclusion MEF can be isolated from Kunming mouse and be used for feeder layers and donor cells. [ key words 1 embryonic fibroblast;feeder layer同nuclear transfer ;embryonic stem cell 核移植(Nuclear transfer , NT) 是指将供体细胞 胞治疗、组织替代、器官移植。目前，已经通过 核移入去核的卵母细胞中，使后者不经精子穿透等 NT技术获得mESC[呵。在NT操作早期需要大量训练， 有性过程即可被激活、分裂并发育，使得核供体的 选用一个取材方便、生长快、可传代的细胞作为供 基因得到完全复制。根据供体细胞来源其可分为胚 体细胞可以方便试验，小鼠胚胎成纤维细胞(mouse 胎干细胞NT、胚胎细胞NT、体细胞NT。胚胎干细胞 embryonic fib